Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD62L de ratón para citometría de flujo - P18337

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la L-selectina

• La L-selectina (CD62L, Ly-22) es una lectina dependiente de calcio (tipo C) que media la adhesión celular al unirse a ligandos de glucoproteínas en células vecinas, desempeñando un papel central en el tráfico de leucocitos. Referencias relacionadas: PMID:1693096
• Es una glucoproteína transmembrana con un dominio de lectina tipo C en el extremo N-terminal, un dominio similar al EGF, dos dominios sushi (CCP/SCR), una región transmembrana y una cola citoplasmática corta (según las palabras clave de UniProt y las anotaciones de dominios).
• La L-selectina se expresa predominantemente en la superficie de los leucocitos, incluidos los linfocitos, y es necesaria para la recirculación de linfocitos al mediar la adhesión a las vénulas endoteliales altas (HEV) de los ganglios linfáticos periféricos.
• Tras la activación de los leucocitos, la L-selectina se desprende rápidamente de la superficie celular mediante proteólisis, lo que regula el rodamiento y la transmigración de los leucocitos.
• También participa en la unión inicial y el rodamiento de los leucocitos a lo largo del endotelio activado en los sitios de inflamación, un requisito previo para la adhesión firme y la extravasación.
• A nivel subcelular, la L-selectina se localiza en la membrana celular y se concentra en las puntas de las microvellosidades, lo que facilita su interacción con los ligandos en condiciones de flujo.
• Familia génica: SELL pertenece a la familia de las selectinas (SELL, SELE, SELP), que son glucoproteínas transmembrana de tipo I con una arquitectura de dominios similar y median las interacciones célula-célula en el sistema vascular.
• Especificidad tisular: se expresa principalmente en tejidos linfoides, en consonancia con su función en la recirculación de linfocitos y la vigilancia inmunitaria.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca la región extracelular (aa 39–332) de CD62L de ratón, incluidos los dominios de lectina y similares al EGF que probablemente están expuestos en la superficie celular; por lo tanto, el anticuerpo monoclonal resultante es adecuado para detectar CD62L nativo en células vivas mediante citometría de flujo.
• Al ser un anticuerpo monoclonal recombinante de conejo, ofrece una alta consistencia entre lotes y una elevada afinidad, minimizando la variabilidad en aplicaciones sensibles.
• El conjugado proporciona una marca fluorescente en el rojo lejano con alta intensidad y fotostabilidad, ideal para paneles de citometría de flujo multicolor con una superposición mínima en el rango visible.
• Dado que CD62L se desprende rápidamente después de la estimulación celular, se recomienda optimizar los pasos de preparación de muestras (por ejemplo, la temperatura y el tiempo de estimulación) para preservar la expresión en la superficie y garantizar una tinción reproducible.
• Aunque el peso molecular previsto es de 42 kDa, la proteína madura glucosilada puede migrar con un peso molecular aparente mayor en SDS-PAGE; si se adapta para Western blot, se debe validar en condiciones reductoras adecuadas.

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