anticuerpo monoclonal de conejo anti-ratón CD69 para citometría de flujo - P37217

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del CD69

• El antígeno de activación temprana CD69 es un receptor de lectina tipo C transmembrana que se regula rápidamente al alza en la superficie de las plaquetas, los linfocitos T y las células NK tras la activación, desempeñando un papel central en la homeostasis y la señalización de las células inmunes.
• Regula negativamente la diferenciación de las células Th17 a través de una interacción dependiente de carbohidratos con la galectina-1/LGALS1 en las células dendríticas inmaduras, y la asociación de la cola citoplásmica con la señalización JAK3/STAT5 controla la transcripción de RORγt. Referencias relacionadas: PMID:20696842
• Actúa como un regulador negativo de la quimiotaxis de linfocitos y células dendríticas al actuar como un agonista del receptor de esfingosina 1-fosfato 1 (S1PR1), promoviendo la internalización y degradación del S1PR1. Referencias relacionadas: PMID:16525420
• En eosinófilos, la participación del CD69 induce la producción de IL-10 a través de la activación de la vía ERK1/2, contribuyendo a las funciones inmunorreguladoras. Referencias relacionadas: PMID:38540778
• También funciona como un receptor de lipoproteínas de baja densidad oxidadas (oxLDL) en los linfocitos T CD4, regulando negativamente las respuestas inflamatorias mediante la inducción de PDCD1 dependiente de NFAT, y promueve la conversión de células T reguladoras a través de la interacción con el complejo S100A8/S100A9.
• Se localiza en la membrana celular con una topología transmembrana de un solo paso y una secuencia de anclaje de señal; el dominio extracelular incluye un dominio de reconocimiento de carbohidratos (CRD) (UniProt: P37217).
• Especificidad de tejido: se detecta en la superficie de células T activadas, células B, células asesinas naturales (NK), neutrófilos, plaquetas y eosinófilos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la formación de enlaces disulfuro, glicosilación N-ligada y fosforilación, como indican las palabras clave: "Enlace disulfuro", "Glicoproteína", "Fosfoproteína".

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado (aa 64-199 del CD69 de ratón) cubre la mayor parte del dominio extracelular de reconocimiento de carbohidratos (CRD), que está expuesto en la superficie celular; este diseño probablemente garantiza un reconocimiento eficiente de la proteína nativa en la citometría de flujo.
• Para aplicaciones de citometría de flujo, considere titular el anticuerpo para determinar la concentración de tinción óptima para su tipo celular específico y la configuración del instrumento.
• Incluya los controles apropiados, como controles negativos de isotipo coincidente, controles de fluorescencia menos uno (FMO) y discriminación de vivos/muertos para clasificar con precisión las poblaciones positivas para CD69.
• Valide la especificidad teñiendo células de ratones knockout para CD69 o utilizando un péptido/proteína de bloqueo si está disponible, para confirmar que la señal es dependiente del antígeno.
• Tenga en cuenta que el CD69 es un marcador de activación rápida; el tiempo de estimulación y las condiciones de fijación/permeabilización pueden necesitar optimización dependiendo del contexto biológico.

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