Anticuerpo monoclonal de conejo anti-CD8a de ratón conjugado con para citometría de flujo - P01731

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización del CD8a

• CD8a (glucoproteína de superficie celular T CD8 cadena alfa), también conocido como Lyt-2, es una glucoproteína integral de membrana que pertenece a la superfamilia de las inmunoglobulinas. Desempeña un papel fundamental en la inmunidad adaptativa al servir como correceptor para las moléculas del MHC de clase I en las células T.
• En las células T, el CD8a forma heterodímeros con el CD8b e interactúa simultáneamente con el receptor de células T (TCR) y los complejos MHC de clase I:péptido en las células presentadoras de antígeno, reforzando así la interacción y permitiendo la activación de las células T.
• Tras la unión al MHC de clase I, el CD8a recluta la quinasa de la familia Src LCK al complejo TCR-CD3, desencadenando cascadas de fosforilación que conducen a la producción de linfocinas, motilidad celular, adhesión y la activación de los linfocitos T citotóxicos (CTL).
• En las células asesinas naturales (NK), los homodímeros de CD8a confieren una ventaja de supervivencia al facilitar la conjugación y lisis secuencial de múltiples células diana, independientemente de su función como correceptor en las células T.
• La señalización del CD8a promueve la supervivencia y diferenciación de los linfocitos activados en células T CD8+ de memoria, contribuyendo a la memoria inmunológica a largo plazo.
• CD8a es una proteína transmembrana localizada en la membrana celular, que presenta un péptido señal, un dominio extracelular tipo inmunoglobulina y una cola citoplasmática que está palmitoilada.
• La proteína sufre diversas modificaciones postraduccionales, incluida N‑glicosilación, formación de enlaces disulfuro y palmitoilación, que son críticas para su estabilidad, plegamiento y anclaje a la membrana.
• El empalme alternativo del gen Cd8a produce múltiples isoformas, que potencialmente modulan su expresión y función en diferentes tipos celulares.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno (aminoácidos 28–196 del CD8a de ratón) corresponde a la región extracelular, lo que hace que este conjugado sea adecuado para detectar el CD8a de superficie celular mediante citometría de flujo sin necesidad de permeabilización.
• Para citometría de flujo, valore el anticuerpo para determinar la concentración óptima para su tipo celular específico y protocolo de tinción. Incluya un control de isotipo apropiado y un discriminador de células vivas/muertas para garantizar una selección precisa (gating).
• Incube con el anticuerpo durante 20–30 minutos sobre hielo y en la oscuridad para minimizar la internalización del antígeno y el blanqueo del fluoróforo. Lave las células minuciosamente para reducir la unión inespecífica.
• El CD8a se expresa en células T citotóxicas y subconjuntos de células NK; por lo tanto, el anticuerpo se puede utilizar para identificar y fenotipar estas poblaciones en tejidos linfoides y sangre de ratón.
• Al ser un anticuerpo monoclonal de conejo, este reactivo suele ofrecer una alta consistencia entre lotes y un bajo fondo, pero valide siempre el rendimiento en su propio sistema de muestra.

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