Anticuerpo monoclonal de conejo anti-IgE de ratón para citometría de flujo (intracelular) - P06336

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la región constante de la cadena pesada de IgE de ratón

• La épsilon constante de cadena pesada de inmunoglobulina (cadena pesada de IgE) es la región constante de las cadenas pesadas de inmunoglobulina épsilon, que junto con las cadenas ligeras forman los anticuerpos IgE.
• Los anticuerpos IgE son glicoproteínas producidas por linfocitos B; pueden existir como receptores de células B unidos a membrana o como anticuerpos secretados presentes en el suero y secreciones mucosas.
• Los dominios variables de las cadenas pesadas y ligeras se ensamblan mediante recombinación V(D)J y sufren mutación somática hipermutación tras la exposición al antígeno, lo que permite la maduración de afinidad por antígenos específicos.
• La IgE unida a membrana en las células B actúa como receptor de antígenos; la unión al antígeno desencadena la expansión clonal de las células B y su diferenciación en plasmocitos secretadores de anticuerpos.
• La IgE secretada media las funciones efectoras al unirse a receptores Fc épsilon de alta afinidad en mastocitos y basófilos, jugando un papel central en las respuestas alérgicas y la defensa contra parásitos.
• La región constante de IgE contiene múltiples dominios de inmunoglobulina, y su estructura está estabilizada por enlaces disulfuro y glicosilación N-ligada (palabras clave UniProt: Enlace disulfuro, Glicoproteína, Dominio de inmunoglobulina).
• A nivel subcelular, la IgE se localiza tanto en la membrana celular (como receptor de célula B) como secretada al espacio extracelular.

Orientación experimental y consejos técnicos

• Este anticuerpo está conjugado directamente con , un colorante fluorescente rojo lejano compatible con los equipos estándar de citometría de flujo; se recomienda para tinción intracelular (CF intra).
• El inmunógeno cubre los aminoácidos 83–421 de la región constante de IgE de ratón, por lo que el anticuerpo probablemente reconoce tanto las formas de IgE unidas a membrana como las secretadas después de la permeabilización.
• Para citometría de flujo intracelular, optimice las condiciones de fijación y permeabilización utilizando células control positivas y negativas apropiadas (por ejemplo, células B de ratón que expresan IgE frente a linfocitos IgE negativos).
• Considere incorporar un control de isotipo y un colorante de viabilidad en el panel para distinguir la tinción específica.
• Al diseñar paneles multicolor, tenga en cuenta que es espectralmente similar a APC y Alexa Fluor® 647; evite la co-tinción con estos colorantes a menos que se haya verificado la compensación adecuada.

CamelBio: Su puente de abastecimiento integral

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