Anticuerpo monoclonal de conejo anti-IgM de ratón para citometría de flujo - P01872

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la región constante mu de cadena pesada de inmunoglobulina

• La región constante mu de cadena pesada de inmunoglobulina (región constante de cadena pesada IgM) está codificada por el gen Ighm (Igh-6) y constituye la región constante de los anticuerpos IgM.
• La IgM unida a membrana (mIgM) es un componente central del complejo del receptor de linfocitos B (BCR), que proporciona una señalación tónica constitucional esencial para la supervivencia de linfocitos B y media la señalización del pre-BCR que regula la selección de linfocitos B y la exclusión alélica.
• La IgM secretada (sIgM) forma multímeros, principalmente pentámeros (ocasionalmente hexámeros), lo que confiere una alta avididad en el reconocimiento de antígenos. Las sIgM naturales son polirreactivas, reconocen estructuras propias y de patógenos, mientras que las sIgM inmunes son específicas de antígeno; ambas son necesarias para una respuesta inmune humoral eficiente. Referencias relacionadas: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• La sIgM media las funciones efectoras principalmente a través de receptores Fc (por ejemplo, FCMR en células linfoides) y el sistema del complemento. Recluta a C1q para iniciar la vía clásica del complemento y, junto con C1q y la lectina de unión a manosa, promueve la fagocitosis de células apoptóticas por macrófagos, ayudando a eliminar epítopos autoinmunogénicos. Referencias relacionadas: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• En la inmunidad de mucosa, la sIgM se transporta a través del epitelio mucoso mediante el receptor de inmunoglobulina polimérica (PIGR) para explorar el revestimiento mucoso. Los complejos de IgM y antígeno pueden sufrir retrotranscitosis mediada por FCMR a través de las células M hacia las células presentadoras de antígeno en los tejidos linfoides mucosos. Referencias relacionadas: PMID:34788614
• Localización subcelular: La forma secretada se libera al espacio extracelular; la forma unida a membrana se encuentra en la membrana celular con un dominio transmembrana de una sola pasada.
• Especificidad tisular: Se expresa en la médula ósea y en las células B-1 y B-2 (a nivel de proteína).
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la formación de enlaces disulfuro y glicosilación, fundamentales para el plegamiento correcto y la formación de multímeros.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno comprende los aminoácidos 105-454 de la región constante de la IgM de ratón; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca el dominio constante de todas las subclases de IgM de ratón independientemente de la especificidad de la región variable.
• Para citometría de flujo, titule el anticuerpo en esplenocitos de ratón o líneas celulares B para determinar la concentración óptima de tinción. Considere la tinción simultánea con un marcador pan de linfocitos B (por ejemplo, anti-CD19) para confirmar la especificidad.
• El fluoróforo es un colorante de infrarrojo cercano (excitación ~650 nm, emisión ~668 nm). Asegúrese de que su citómetro esté equipado con un láser rojo adecuado (por ejemplo, 633 nm o 640 nm).
• Si realiza tinción intracelular, optimice las condiciones de fijación y permeabilización, ya que el epítopo se encuentra dentro de la región constante y puede conservarse después de la permeabilización.
• Incluya un control de isotipo (monoclonal de conejo conjugado con el mismo fluoróforo) para tener en cuenta la unión no específica.

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