Anticuerpo Monoclonal Conejo anti-Ratón LAMP1/CD107a para IF/ICC, FC - P11438

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de LAMP1/CD107a

• La glicoproteína 1 asociada a membrana de lisosomas (LAMP1/CD107a) es una proteína transmembrana altamente glicosilada, también conocida como LGP-120, P2B o CD107a.
• Esencial para la biogénesis de lisosomas, regulación del pH, autofagia y homeostasis del colesterol, actuando como un inhibidor directo del canal de protones TMEM175 para mantener un lumen ácido. Referencias relacionadas: PMID:15121881
• En las células asesinas naturales (NK), LAMP1 participa en el movimiento de los gránulos citotóxicos hacia la superficie celular y en el tráfico de perforina hacia los gránulos líticos, permitiendo la eliminación de células diana.
• Protege a las células NK del daño asociado a la desgranulación al prevenir lesiones autoinfligidas por el contenido de sus propios gránulos citotóxicos. Referencias relacionadas: PMID:23847195
• Presenta ligandos de carbohidratos a las selectinas y se ha implicado en la metástasis de células tumorales. Referencias relacionadas: PMID:2676155
• Se localiza principalmente en las membranas de los lisosomas y endosomas tardíos, pero también se transporta a la membrana celular y a la membrana de los gránulos citolíticos tras la activación.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen una extensa glicosilación N-ligada y la formación de enlaces disulfuro, críticas para su estabilidad estructural y función dentro del entorno lisosomal.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), utilice una fijación adecuada (p. ej., PFA al 4%) y permeabilización (p. ej., Tritón X-100 al 0,1%) para permitir el acceso del anticuerpo a los compartimentos lisosomales intracelulares. El fluoróforo conjugado elimina la necesidad de un anticuerpo secundario, simplificando el protocolo.
• En citometría de flujo (FC), LAMP1 es predominantemente intracelular en condiciones de reposo, pero puede detectarse en la superficie celular después de la activación celular (p. ej., desgranulación de células NK). Considere incluir un paso de activación celular y usar un colorante de viabilidad para excluir células muertas.
• Valide el anticuerpo en una línea celular de ratón relevante o en un sistema de células primarias que se sepa que expresa LAMP1 (p. ej., macrófagos RAW 264.7 o células NK primarias) e incluya controles de isotipo apropiados para FC.
• El inmunógeno cubre los aminoácidos 208–363 del dominio luminal, que puede ser sensible a la desnaturalización; evite una fijación excesiva que pueda enmascarar el epítopo.

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