Anticuerpo policlonal de conejo anti-PERK para WB, IHC-P, IF/ICC y ELISA - Q9NZJ5

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de PERK

• El factor de iniciación de la traducción eucariota 2-alfa cinasa 3 (EIF2AK3), conocido comúnmente como PERK (cinasa del retículo endoplásmico similar a PRKR), también denominado cinasa pancreática de eIF2-alfa (HsPEK), tirosina-proteína cinasa EIF2AK3, PEK y WRS.
• Actúa como una cinasa sensora del estrés metabólico que fosforila la subunidad alfa del factor de iniciación de la traducción eucariota 2 (EIF2S1/eIF-2-alfa) en respuesta al estrés del retículo endoplásmico, funcionando como un efector clave de la respuesta a proteínas mal plegadas (UPR). Referencias relacionadas: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:11907036
• Tras su activación, la fosforilación de eIF-2-alfa mediada por PERK atenúa la traducción global dependiente de cap, al tiempo que promueve selectivamente la traducción de ARNm específicos de la respuesta integrada al estrés (ISR), como ATF4 y QRICH1, permitiendo la reprogramación celular. Referencias relacionadas: PMID:10026192, PMID:10677345, PMID:31023583
• Además, fosforila NFE2L2/NRF2 bajo condiciones de estrés, promoviendo su liberación del complejo KEAP1, su acumulación nuclear y la activación de genes de respuesta antioxidante.
• Contribuye a la regulación mitocondrial: la señalización de la UPR dependiente de PERK aumenta la fosforilación oxidativa al impulsar la expresión de COX7A2L/SCAF1 mediada por ATF4 y la formación de supercomplejos de la cadena respiratoria; en los sitios de contacto entre las mitocondrias y el retículo endoplásmico, su actividad es inhibida por ATAD3A para proteger la función mitocondrial. Referencias relacionadas: PMID:31023583, PMID:39116259
• Es esencial para la detención del crecimiento en la fase G1 inducida por la UPR mediante la pérdida de ciclina D1 (CCND1).
• Se localiza en la membrana del retículo endoplásmico y se expresa de forma ubicua, con niveles particularmente elevados en los tejidos secretores.
• Palabras clave: ADP-ribosilación, unión a ATP, respuesta al estrés, regulación de la traducción, serina/treonina-proteína cinasa, tirosina-proteína cinasa, respuesta a proteínas mal plegadas.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno (residuos 867–1116) abarca el dominio cinasa; se espera que el anticuerpo reconozca la región citoplasmática C-terminal de PERK.
• En Western blot, se espera una banda específica cercana a 125 kDa; valide utilizando lisados celulares o tisulares positivos y negativos adecuados.
• En IHC-P e IF/ICC, la tinción debería reflejar la localización en el retículo endoplásmico; considere utilizar inductores del estrés del retículo endoplásmico (por ejemplo, tunicamicina y tapsigargina) como controles experimentales.
• Para ELISA, la naturaleza policlonal puede proporcionar una amplia cobertura de epítopos; ajuste la titulación y confirme la especificidad con proteína PERK recombinante o PERK endógeno procedente de muestras sometidas a estrés.

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