Anticuerpo monoclonal de conejo anti-rata IFN-gamma () para citometría de flujo - P01581

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización del IFN-gamma

• El IFN-gamma es un interferón de tipo II, una citocina crítica para la inmunidad innata y adaptativa contra infecciones virales, bacterianas y protozoarias.
• Se produce predominantemente por linfocitos T activados y células asesinas naturales (NK).
• La señalización a través del receptor de IFN-gamma (IFNGR1/IFNGR2) activa la vía JAK-STAT, lo que conduce a la transcripción de genes estimulados por interferón.
• Juega un papel clave en la presentación de antígenos al inducir subunidades del inmunoproteasoma y aumentar la regulación de las moléculas de clase I y II del MHC en la superficie celular de clase I y II del MHC en la superficie celular.
• Participa en la regulación de la quiescencia y diferenciación de las células madre hematopoyéticas en condiciones de homeostasis.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la glicosilación y la formación de pirroglutamato en el extremo N-terminal (ácido pirrolidona carboxílico).
• Proteína secretada, liberada principalmente de células inmunes activadas.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para la citometría de flujo intracelular, los pasos de fijación y permeabilización deben optimizarse para su tipo celular específico. Los protocolos estándar que utilizan fijación con paraformaldehído y permeabilización a base de saponina pueden ser adecuados.
• Incluya controles de células T de rata no estimuladas y estimuladas para confirmar la especificidad del anticuerpo. La estimulación con PMA/ionomicina de esplenocitos de rata es un control positivo común.
• El conjugado se excita con láseres de 633-647 nm y emite en el canal rojo lejano (por ejemplo, canal APC). Asegúrese de configuraciones de compensación apropiadas.
• El inmunógeno abarca los aminoácidos 20-156, correspondientes a la proteína madura de IFN-gamma, lo que sugiere que el anticuerpo reconoce la forma secretada natural.
• Titule la concentración del anticuerpo para una tinción óptima y un fondo mínimo.

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