Anticuerpo monoclonal de rata anti-ratón CD3 para citometría de flujo - P04235 / P22646

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de CD3 (cadenas delta y epsilon)

• El CD3 delta (gen Cd3d) y epsilon (Cd3e) son componentes esenciales del complejo receptor de células T (TCR)-CD3 en la superficie de los linfocitos T, desempeñando un papel central en la inmunidad adaptativa.
• El complejo CD3 (cadenas delta, epsilon, gamma y CD247/zeta) transduce señales de activación tras la interacción del TCR con células presentadoras de antígenos, mediante la fosforilación de motivos de activación basados en tirosina de inmunorreceptores (ITAM) en sus dominios citoplasmáticos.
• CD3D es crítico para la diferenciación de timocitos y la expresión superficial adecuada del complejo TCR-CD3; su interrupción afecta el desarrollo de las células T. Referencias relacionadas: PMID:10935641
• El CD3 delta interactúa con los correceptores CD4 y CD8, vinculando funcionalmente el reconocimiento del TCR con la señal del correceptor, lo cual es necesario para la activación y la selección positiva de las células T CD4+ o CD8+.
• Tanto las cadenas delta como epsilon del CD3 son glicoproteínas transmembrana de tipo I localizadas en la membrana plasmática.
• Las modificaciones postraduccionales clave incluyen la formación de enlaces disulfuro, la glicosilación y la fosforilación de ITAM por las quinasas de la familia Src LCK y FYN.
• Juntas, las cadenas delta y epsilon del CD3 tienen pesos moleculares de aproximadamente 19 kDa y 21 kDa, respectivamente.

Guía experimental y consejos técnicos

• El conjugado fluorescente permite la detección directa en citometría de flujo (FC) sin necesidad de reactivos de tinción secundaria.
• Para reducir la unión inespecífica, considere preincubar las células con un reactivo de bloqueo del receptor Fc apropiado y utilizar un control de isotipo de IgG de rata coincidente.
• Optimice la concentración del anticuerpo mediante titulación en un rango (p. ej., 0,1–5 µg/mL) en el sistema celular relevante para lograr la mejor relación señal-ruido.
• Prepare suspensiones de células únicas y evalúe la viabilidad antes de la tinción para garantizar resultados sólidos y reproducibles.
• Se recomienda el uso del anticuerpo con muestras de ratón; valide las condiciones del ensayo para su configuración experimental específica.

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