anticuerpo monoclonal de Rata anti-Ratón CD45R/B220 para Citometría de Flujo - P06800

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de CD45R/B220 (Proteína tirosina fosfatasa C tipo receptor)

• CD45R/B220, codificado por el gen Ptprc, es una proteína tirosina fosfatasa C tipo receptor (PTPRC), también conocida como antígeno común de leucocitos (L-CA), antígeno de linfocitos 5 (Ly-5) y T200. Se generan múltiples isoformas a través del splicing alternativo, produciendo variantes de diferentes pesos moleculares (p. ej., 130, 140, 144 kDa).
• PTPRC funciona como un regulador positivo crítico de la activación de células T: su primer dominio de fosfatasa tiene actividad enzimática, mientras que el segundo modula la especificidad del sustrato. Tras la interacción del receptor de células T, recluta y desfosforila moléculas de señalización como SKAP1 y FYN (por similitud).
• También desfosforila la quinasa de la familia Src LYN, modulando así la actividad de la quinasa LYN e influyendo en las cascadas de señalización descendente en los linfocitos.
• A nivel subcelular, PTPRC se localiza en la membrana celular, enriquecida en balsas de lípidos de membrana, y se concentra en la sinapsis inmunológica entre células T y células presentadoras de antígenos.
• PTPRC interactúa con CLEC10A en células dendríticas inmaduras en la interfaz célula T–célula dendrítica; esta interacción reconoce el CD45 portador de antígeno Tn en las células T efectoras, ajustando el umbral de activación de las células T para limitar la autoinmunidad.
• La proteína sufre glicosilación y fosforilación, como indican las palabras clave Glucoproteína y Fosfoproteína. Es una proteína transmembrana de tipo I con un péptido señal, un dominio extracelular grande, una hélice transmembrana única y dos dominios de fosfatasa intracelulares.
• En ratones, CD45R/B220 se expresa predominantemente en linfocitos B y un subconjunto de células T, lo que lo convierte en un marcador clásico para los linajes de células B en estudios inmunológicos.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Para citometría de flujo, titule el anticuerpo conjugado a para determinar la concentración óptima para su tipo de célula específico y protocolo de tinción, ya que la unión no específica puede reducirse mediante una titulación adecuada.
• Incluya controles de isotipo apropiados (IgG de rata conjugado al mismo fluoróforo) para establecer los parámetros de compensación y clasificación (gating) en paneles multicoloresur.
• Valide el rendimiento del anticuerpo en poblaciones celulares positivas y negativas conocidas (p. ej., esplenocitos de ratón donde las células B son CD45R/B220+ y los subconjuntos de células T son mayoritariamente negativos).
• Debido al gran dominio extracelular y las múltiples isoformas, asegúrese de que el inmunógeno recombinante corresponda al epítopo reconocido por este clon si la reactividad cruzada entre isoformas es crítica.
• Conserve el anticuerpo a 2–8°C protegido de la luz; evite ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener la estabilidad del conjugado.

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