Anticuerpo monoclonal de rata anti-CD45R/B220 de ratón para citometría de flujo - P06800 / P08575

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de CD45R/B220

• La tirosina proteína fosfatasa de tipo receptor C (PTPRC), comúnmente conocida como CD45, L-CA, Ly-5 o T200, es una glicoproteína transmembranal. La isoforma B220 se expresa específicamente en linfocitos B y corresponde a la variante de alto peso molecular de CD45.
• CD45 es esencial para la activación de linfocitos T a través del receptor de linfocitos T (TCR), actuando como regulador positivo de la coactivación de linfocitos T al unirse a DPP4. El primer dominio fosfatasa posee la actividad enzimática, mientras que el segundo influye en la especificidad por el sustrato.
• Tras la activación de linfocitos T, CD45 recluta y desfosforila a SKAP1 y FYN, además de desfosforilar a LYN, modulando así sus actividades cinasa.
• En la sinapsis inmunológica, CD45 interactúa con CLEC10A en células dendríticas inmaduras; esta interacción reconoce a CD45 que porta el antígeno Tn en linfocitos T efectores y contribuye a la modulación de los umbrales de activación de linfocitos T, ayudando a prevenir la autorreactividad.
• CD45 se localiza en la membrana celular, las balsas de membrana y la sinapsis inmunológica, lo que concuerda con su función en la transducción de señales durante el contacto célula-célula.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas de CD45 (por ejemplo, CD45R, CD45RO, B220), que se expresan de forma diferencial entre subpoblaciones de leucocitos e influyen en los resultados de la señalización.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen una extensa glicosilación N- y O-ligada y fosforilación, que regulan la actividad fosfatasa y la expresión superficial.
• El CD45 de ratón está codificado por el gen Ptprc (Ly-5). El anticuerpo descrito aquí presenta reactividad cruzada con CD45R/B220 de ratón.

Guía experimental y consejos técnicos

• El anticuerpo está conjugado con , un fluoróforo excitable por láser violeta. Verifique que su citómetro de flujo cuente con un láser de 405 nm y filtros de emisión adecuados (por ejemplo, paso de banda 450/50) para una detección óptima.
• Según el proveedor, el anticuerpo presenta reactividad cruzada con CD45R/B220 de ratón. Si trabaja con muestras humanas o de otras especies, realice las pruebas de reactividad cruzada correspondientes antes de su uso.
• CD45R/B220 se expresa predominantemente en linfocitos B; incluya controles de tinción positivos (por ejemplo, esplenocitos o líneas celulares B) y negativos (por ejemplo, linfocitos T) bien caracterizados para confirmar la especificidad en los paneles de citometría de flujo.
• El inmunógeno utilizado para la generación incluye un péptido de CD45R/B220 de ratón/humano; por lo tanto, el anticuerpo podría teóricamente reconocer a CD45R/B220 humano. Se recomienda realizar la validación en la especie y el sistema de muestra correspondientes.
• Los pesos proteicos de 130 a 144 kDa corresponden a diferentes isoformas de CD45. Para aplicaciones distintas a la citometría de flujo (por ejemplo, transferencia Western), asegúrese de contar con marcadores de peso molecular adecuados y tenga en cuenta que este producto solo está validado para CF.
• Almacene y manipule el anticuerpo siguiendo las recomendaciones para conjugados fluorescentes; tras la recepción, el producto se envía en bolsas de hielo para mantener su estabilidad.

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