Anticuerpo monoclonal de conejo RCHY1 para WB y ELISA - Q96PM5

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de RCHY1

• RCHY1 es una ubiquitina-proteína ligasa E3 que ubiquitina múltiples dianas, incluyendo p53/TP53, TP73, HDAC1 y CDKN1B (PubMed:16914734, PubMed:17721809, PubMed:18006823). Referencias relacionadas: PMID:16914734 PMID:17721809 PMID:18006823
• Intermedia la ubiquitinación y degradación de p53/TP53, con preferencia por p53 tetramérica, afectando la detención del ciclo celular y la apoptosis (PubMed:19043414, PubMed:19483087). Referencias relacionadas: PMID:19043414 PMID:19483087
• Monoubiquitina la polimerasa de ADN de translesión POLH, regulando la tolerancia al daño del ADN (PubMed:21791603). Referencias relacionadas: PMID:21791603
• Participa en el control de calidad asociado a ribosomas al ubiquitinar cadenas nascentes bloqueadas, facilitando su degradación (PubMed:33909987). Referencias relacionadas: PMID:33909987
• Una isoforma por splicing alternativo carece de actividad de ubiquitina-proteína ligasa E3.
• Se localiza en el núcleo (incluyendo las speckles nucleares) y el citoplasma.
• Se modifica postraduccionalmente por fosforilación.
• Contiene dominios dedo de RING tipo C3HC4 y dedo de zinc CHY, que unen zinc y son esenciales para la función catalítica.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 160-261 de RCHY1 humano, una región que puede proporcionar epítopos accesibles en condiciones desnaturalizantes (WB) y nativas (ELISA).
• Para el análisis por WB, cargue lisados de células completas de líneas celulares humanas y espere una banda cerca de 30 kDa; valide con un control positivo conocido y un control negativo apropiado (por ejemplo, células knockout para RCHY1).
• Para ELISA, recubra proteína recombinante de RCHY1 como estándar y confirme la especificidad por competición o probando el anticuerpo en muestras despojadas del diana.
• Dado que RCHY1 es una fosfoproteína, considere experimentos con tratamiento de fosfatasa si se observan desplazamientos de banda.
• Siempre titule el anticuerpo a partir de una concentración inicial recomendada para determinar la dilución de trabajo óptima para cada ensayo.

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