RELA pAb de conejo - Q04207

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de RELA/p65

• RELA/p65 es una subunidad del complejo del factor de transcripción NF-kappa-B, un regulador pleiotrópico presente en casi todos los tipos celulares que desempeña un papel central en la inflamación, la inmunidad, la diferenciación, el crecimiento celular, la tumorigénesis y la apoptosis.
• Los complejos NF-kappa-B son homodímeros o heterodímeros formados por RELA, RELB, NFKB1/p105, NFKB1/p50, REL y NFKB2/p52; el heterodímero RELA-NFKB1 es la forma más abundante y actúa como activador transcripcional al unirse a los sitios kappa-B en los promotores de los genes diana.
• RELA puede modular la accesibilidad de los promotores a los factores de transcripción y regular indirectamente la expresión génica, contribuyendo a su amplio potencial regulador. Referencias relacionadas: PMID:29813070
• En las células no estimuladas, los dímeros de NF-kappa-B están secuestrados en el citoplasma por las proteínas inhibidoras I-kappa-B; tras la activación, I-kappa-B se fosforila y se degrada, liberando RELA para que se transloque al núcleo.
• RELA experimenta múltiples modificaciones postraduccionales, incluidas la acetilación y la fosforilación, que ajustan con precisión su actividad transcripcional, su afinidad de unión al ADN y sus interacciones con correguladores.
• A nivel proteico, RELA se expresa en el miocardio, lo que sugiere funciones específicas de tejido más allá de sus funciones de señalización ubicuas.
• La localización subcelular de RELA se regula dinámicamente, alternando entre el citoplasma y el núcleo según el estado de activación de la vía NF-kappa-B.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 400–500 del extremo C-terminal de RELA de ratón, lo que garantiza el reconocimiento de la proteína completa entre especies con alta homología. Considere realizar una alineación de secuencias si amplía su uso a otros organismos.
• Para Western blot, se espera una banda de aproximadamente 60 kDa; incluya controles positivos adecuados, como células HeLa o RAW 264.7 estimuladas, y verifique la especificidad utilizando lisados con knockdown o knockout, si están disponibles.
• En inmunofluorescencia/ICC, la localización de RELA suele ser citoplasmática en las células en reposo y nuclear tras la activación de NF-kappa-B; optimice las condiciones de fijación y permeabilización para conservar esta señal y utilice estímulos adecuados, como TNF-alfa, para validar la translocación nuclear.
• Para aplicaciones de ELISA, la combinación con un anticuerpo de captura validado puede mejorar la sensibilidad del ensayo. Titule el anticuerpo para determinar las concentraciones de trabajo óptimas en su matriz de muestra específica.

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