pAb de conejo contra SARS-CoV-2 ORF3A - P0DTC3

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la proteína ORF3A de SARS-CoV-2

• La proteína ORF3a es una proteína accesoria de SARS-CoV-2, también conocida como Proteína 3a, Proteína U274 o Proteína X1.
• Desempeña un papel clave en la salida viral al facilitar el transporte lisosomal de los viriones (PubMed:33157038, PubMed:33422265). Referencias relacionadas: PMID:33157038 PMID:33422265
• ORF3a forma canales iónicos homotetraméricos (viroporinas) en las membranas endosomales y lisosomales, pudiendo inducir la desacidificación lisosomal para promover una liberación viral segura (PubMed:33157038, PubMed:33422265, PubMed:34158638). Referencias relacionadas: PMID:33157038 PMID:33422265 PMID:34158638
• Esta proteína altera la autofagia del huésped al unirse a VPS39 en endosomas tardíos, lo que bloquea la fusión de autofagosoma-lisosoma y la formación de autofagolisosomas (PubMed:33422265). Referencias relacionadas: PMID:33422265
• ORF3a induce la reticulofagia dependiente de RETREG1/FAM134B al interactuar con HMGB1, potenciando la asociación HMGB1-BECN1 y causando estrés reticular y respuestas proinflamatorias (PubMed:35239449). Referencias relacionadas: PMID:35239449
• Subcelularmente, ORF3a se localiza en el virión, la membrana de la célula huésped, la membrana del retículo endoplásmico, formas secretadas, el citoplasma, los endosomas y los lisosomas.
• Las palabras clave biológicas principales incluyen glicoproteína, interacción huésped-virus, canal iónico, transporte iónico, activación de la autofagia del huésped y actividad de viroporina.
• La proteína tiene un peso molecular calculado de ~31,1 kDa (UniProt), lo que coincide con los 31 kDa observados esperados para este anticuerpo.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que abarca los aminoácidos 100-200 de la proteína ORF3a; los epitopos de unión del anticuerpo pueden concentrarse en esta región, lo que debe tenerse en cuenta al diseñar experimentos o interpretar los resultados.
• Para Western blotting, la banda esperada de ORF3a es de alrededor de 31 kDa; valide la especificidad utilizando lisados de células infectadas por SARS-CoV-2 o sistemas con sobreexpresión de ORF3a.
• En aplicaciones de ELISA, confirme las condiciones de recubrimiento óptimas y la dilución del anticuerpo utilizando proteína ORF3a recombinante o controles positivos definidos.
• Como anticuerpo policlonal, la consistencia entre lotes puede variar; es recomendable cualificar cada nuevo lote en la aplicación prevista antes de su uso a gran escala.
• El anticuerpo se envía en hielo húmedo; al recibirlo, alicuotelo y almacénelo a -20 °C (o según lo recomendado por el fabricante) para mantener su estabilidad.

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