Anticuerpo monoclonal de conejo contra SARS-CoV-2 Spike RBD (N501Y) para WB, ELISA - P0DTC2

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de SARS-CoV-2 Spike RBD (N501Y)

• La glicoproteína de la espícula (S) del SARS-CoV-2 es una proteína de fusión de clase I trimérica que media la unión y entrada viral a las células huésped mediante la interacción con el receptor de la enzima convertidora de angiotensina 2 (ACE2). Referencias relacionadas: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• Se sintetiza como una proteína precursora y se escinde en las subunidades S1 y S2; la subunidad S1 contiene el dominio de unión al receptor (RBD) que se une a ACE2, mientras que la subunidad S2 media la fusión de membranas.
• La escisión de la subunidad S2 en el sitio S2' por proteasas del huésped TMPRSS2 (en la superficie celular) o catepsina L (en endosomas) expone el péptido de fusión y desencadena cambios conformacionales irreversibles necesarios para la entrada viral. Referencias relacionadas: PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• La proteína de la espícula puede utilizar receptores de entrada alternativos, incluyendo neuropilina-1 (NRP1) y NRP2, integrinas y el receptor de asialoglicoproteína 1 (ASGR1), lo que potencialmente influye en el tropismo tisular. Referencias relacionadas: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• Estructuralmente, el dominio del tallo de la proteína S contiene tres bisagras que confieren una considerable libertad de orientación al dominio de la cabeza, una característica importante para la unión al receptor. Referencias relacionadas: PMID:32817270
• Está altamente glicosilada y contiene múltiples enlaces disulfuro; hay un sitio de palmitoilación en la cola citoplasmática. La proteína de la espícula se localiza en la membrana del virión, la membrana del compartimento intermedio ER-Golgi del huésped y la membrana celular del huésped.
• Las palabras clave también incluyen: inmunoevasión viral, inhibición de la respuesta inmune innata del huésped y actividad de superantígeno, lo que indica funciones más allá de la entrada celular.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un péptido sintético que abarca los aminoácidos 450–550 de la proteína Spike RBD del SARS-CoV-2 (mutante N501Y) y, por lo tanto, es probable que reconozca un epítopo dentro de esta región; confirme la especificidad contra el tipo salvaje y otras variantes si se necesitan datos de reactividad cruzada.
• Para Western blotting (WB), utilice condiciones reductoras y considere la desglicosilación para mejorar la detección de la proteína de la espícula completa de ~141 kDa; valide con RBD recombinante o trímero de la espícula como control positivo.
• En aplicaciones de ELISA, este anticuerpo monoclonal puede servir como reactivo de captura o detección; la concentración de recubrimiento adecuada y las condiciones de bloqueo deben optimizarse en la matriz de muestra relevante.
• Debido al papel crítico del RBD en la unión a células huésped, este anticuerpo puede ser útil para estudios de neutralización o ensayos de unión competitiva, pero dichos usos requieren una validación funcional independiente.

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