Anticuerpo policlonal de conejo anti-SH2B1 para IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NRF2

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de SH2B1

• La proteína adaptadora SH2B1 (SH2B1, también conocida como PSM) es una proteína adaptadora intracelular que carece de actividad enzimática intrínseca pero contiene dominios SH2 y PH, lo que permite su reclutamiento a receptores y adaptadores que contienen fosfotirosina.
• Actúa como mediador de señalización crítico para múltiples receptores tirosina cinasa (RTK) y receptores de citoquinas asociados a la cinasa Janus (JAK), incluyendo la insulina, el factor de crecimiento similar a la insulina 1 (IGF1), el factor de crecimiento nervioso (NGF), el factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF), el factor neurotrófico derivado de la línea celular glial (GDNF), el factor de crecimiento derivado de las plaquetas (PDGF) y los factores de crecimiento de fibroblastos (FGF).
• En la señalización de la hormona de crecimiento (GH) y la leptina, SH2B1 se une a JAK2 autofosforilado y mejora la actividad de la cinasa JAK2, promoviendo vías descendentes como PI3K-Akt a través de la fosforilación de IRS1/2.
• Las isoformas de SH2B1, generadas por splicing alternativo, pueden modular la señalización de manera diferencial; por ejemplo, pueden exhibir roles distintos en la mitogénesis inducida por IGF1 y PDGF.
• A nivel subcelular, SH2B1 se localiza en el citoplasma, la membrana celular y el núcleo, lo cual es consistente con su rol dinámico en la transducción de señales.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la fosforilación en residuos de tirosina y serina/treonina (p. ej., por JAK2), que crean sitios de acoplamiento para otras proteínas de señalización, y la metilación.
• SH2B1 se expresa ampliamente en los tejidos, detectándose los niveles más altos en el músculo esquelético y el ovario, lo que refleja sus amplias funciones reguladoras.

Guía experimental y consejos técnicos

• Para IHC-P, considere optimizar la recuperación de antígenos y la dilución del anticuerpo primario utilizando tejidos de control positivos como el músculo esquelético o el ovario, donde SH2B1 se expresa altamente.
• Para IF/ICC, las condiciones de fijación y permeabilización deben determinarse empíricamente; el anticuerpo puede detectar reservas de membrana, citoplasmáticas y/o nucleares dependiendo del tipo celular y la estimulación.
• Dada la naturaleza policlonal de este anticuerpo, se recomienda realizar un experimento de titulación y validar la especificidad utilizando controles de knockdown o knockout para tener en cuenta la posible variabilidad entre lotes.
• ELISA puede usarse para detectar SH2B1 endógena; sin embargo, deben optimizarse los estándares apropiados y los protocolos de preparación de muestras para el formato de ensayo específico.
• Se predice que este anticuerpo reacciona de forma cruzada con SH2B1 de ratón y rata basándose en la homología de secuencia, pero se recomienda la validación experimental en estas especies.

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