Anticuerpo Monoclonal de Conejo Smac/Diablo para WB, IF/ICC, ELISA - Q9NR28

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de Smac/Diablo

• Diablo (Proteína de unión directa a IAP con pI bajo), también conocido como Second mitochondria-derived activator of caspases (SMAC), es una proteína proapoptótica que promueve la apoptosis activando caspasas en la vía del citocromo c/Apaf-1/caspasa-9.
• Funciona oponiéndose a la actividad inhibidora de las proteínas inhibidoras de apoptosis (IAP), inhibiendo específicamente la unión de BIRC6/BRUCE a las caspasas. Referencias relacionadas: PMID:15200957 PMID:36758104 PMID:36758105
• Diablo atenúa la estabilidad de XIAP/BIRC4 y su actividad inhibidora de la apoptosis promoviendo su ubiquitinación y degradación proteasómica, y disrupta la interacción de XIAP con la caspasa-9 procesada para activar la caspasa-3.
• La proteína se localiza en la mitocondria y se libera al citosol ante estímulos apoptóticos.
• Se expresa de forma ubicua, con los niveles más altos en testículos, y también se expresa mucho en corazón, hígado, riñón, bazo, próstata y ovario; es menor en cerebro, pulmón, timo y leucocitos de sangre periférica.
• El splicing alternativo produce múltiples isoformas, y las mutaciones en este gen se asocian con sordera no sindrómica (DFNA64).
• Las modificaciones postraduccionales incluyen la conjugación de ubiquitina, y la proteína contiene un péptido de tránsito para la dirigencia mitocondrial.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 56–239 del Smac/Diablo humano maduro, cubriendo la región funcional después del procesamiento mitocondrial; es adecuado para detectar la proteína madura endógena (~23 kDa forma procesada) y posiblemente el precursor de longitud completa.
• Para la transferencia Western (Western blotting, WB), considere usar lisados mitocondriales o de células enteras; el peso molecular predicho del precursor de longitud completa es de 27 kDa, mientras que la forma madura después de la escisión del péptido de tránsito migra a aproximadamente 23 kDa. Optimice las condiciones de lisis y carga en consecuencia.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), se puede observar la localización mitocondrial en condiciones de estado estacionario; tras la inducción de la apoptosis, la tinción puede desplazarse al citosol.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede utilizar para capturar o detectar Smac/Diablo recombinante o endógeno; se recomienda emparejarlo con un anticuerpo de detección contra un epítopo no superpuesto para una sensibilidad óptima.
• Se especifica la reactividad cruzada con ratón y rata; al trabajar con estas especies, valide el anticuerpo en el tejido o sistema celular relevante para confirmar la reactividad y especificidad.

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