Anticuerpo monoclonal de conejo contra Smac/Diablo para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NR28

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de Smac/Diablo

• El gen DIABLO (SMAC) codifica una proteína mitocondrial que promueve la apoptosis activando caspasas en la vía del citocromo c/Apaf-1/caspasa-9. Se opone a las proteínas inhibidoras de la apoptosis (IAPs), entre ellas BIRC6/BRUCE, la caspasa-9 y XIAP/BIRC4. Referencias relacionadas: PMID:15200957 PMID:36758104 PMID:36758105
• Smac/Diablo atenúa la estabilidad y la actividad inhibidora de la apoptosis de XIAP/BIRC4 al promover su ubiquitinación y degradación por proteasoma, además interrumpe la interacción entre XIAP y la caspasa-9 para facilitar la activación de la caspasa-3.
• El empalme alternativo genera múltiples isoformas; la isoforma 3 se expresa de forma ubicua y puede presentar defectos en la regulación a la baja de XIAP.
• Subcelularmente, Smac/Diablo se localiza en la mitocondria y se libera al citosol ante estímulos apoptóticos.
• La proteína se expresa de forma ubicua, con niveles más altos en el testículo; también presenta niveles altos en corazón, hígado, riñón, bazo, próstata y ovario; niveles bajos en cerebro, pulmón, timo y leucocitos de sangre periférica.
• Palabras clave: Estructura 3D, Empalme alternativo, Apoptosis, Citoplasma, Sordera, Secuenciación directa de proteínas, Variante de enfermedad, Mitocondria, Sordera no sindrómica, Conjugación Ubl.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno recombinante (aa 56-239) corresponde a la región procesada madura que se espera después de la escisión mitocondrial; el anticuerpo puede detectar tanto la forma de longitud completa (27 kDa) como las formas procesadas (21/22 kDa).
• Para Western blot, se recomienda cargar lisados de control positivo apropiados de tejidos humanos, de ratón o de rata, y optimizar las condiciones reductoras para resolver las distintas isoformas.
• En IHC-P e IF/ICC, se debe optimizar la recuperación de antígeno (por ejemplo, tampón de citrato pH 6,0) y la permeabilización; los patrones de tinción citoplasmática/mitocondrial pueden requerir una validación cuidadosa.
• Las aplicaciones de ELISA requieren la titulación individual de los reactivos de captura y detección; el anticuerpo se puede evaluar como parte de un par emparejado después de pruebas funcionales.

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