Anticuerpo monoclonal de conejo anti-SNX4 para WB, IP, ELISA - O95219

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de SNX4

• SNX4, o sorting nexin-4, es un miembro de la familia de proteínas de nexinas de clasificación, que se caracterizan por la presencia de un dominio de homología a Pox (PX) que facilita la unión a fosfoinositidos y la asociación a membranas.
• SNX4 desempeña un papel central en la regulación de la endocitosis y múltiples etapas del tráfico intracelular (PubMed:12668730, PubMed:17994011, PubMed:32513819). Referencias relacionadas: PMID:12668730 PMID:17994011 PMID:32513819
• Está específicamente implicado en el reciclaje del receptor de transferrina endocitado, evitando su degradación lisosomal y manteniendo así la homeostasis del hierro (PubMed:17994011). Referencias relacionadas: PMID:17994011
• SNX4 contribuye a la biogénesis de autofagosomas al mediar el tráfico y el reciclaje de la escramblasa de fosfolípidos ATG9A, una proteína clave requerida para la autofagia (PubMed:32513819, PubMed:33468622). Referencias relacionadas: PMID:32513819 PMID:33468622
• Subcelularmente, SNX4 se localiza predominantemente en la cara citoplasmática de las membranas de los endosomas tempranos, donde participa en la clasificación de carga y la formación de vesículas.
• Las modificaciones postraduccionales de SNX4 incluyen acetilación y fosforilación, que pueden regular su actividad, localización o interacciones proteicas.
• El gen SNX4 sufre empalme alternativo, generando múltiples variantes de transcrito que pueden codificar isoformas proteicas distintas con funciones potencialmente diferentes.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno utilizado para generar este anticuerpo corresponde a un fragmento recombinante que cubre los aminoácidos 321–400 de la SNX4 humana, cerca de la región C-terminal, lo que permite el reconocimiento de conformaciones proteicas nativas y desnaturalizadas.
• Para Western blotting, prepare lisados de células enteras utilizando un tampón de muestra RIPA o SDS estándar; se espera una banda proteica cerca de 52 kDa en condiciones reductoras. Considere incluir un control positivo como extractos de células HeLa o HEK293T, que expresan SNX4 endógena.
• En ensayos de inmunoprecipitación, optimice la relación anticuerpo:lisado y utilice un sistema de perlas compatible (por ejemplo, agarosa proteína A/G) para IgG de conejo. Valide la recuperación mediante Western blot con un anticuerpo anti-SNX4 diferente.
• Para aplicaciones de ELISA, pruebe una gama de concentraciones de antígeno de recubrimiento y diluciones de anticuerpo utilizando proteína recombinante o péptido de SNX4. Asegúrese de que el epítopo sea accesible en el formato de recubrimiento.
• El anticuerpo tiene reactividad cruzada con la SNX4 de ratón; realice una validación inicial en sistemas modelo tanto humanos como de ratón para confirmar el rendimiento específico por especie.
• Debido a que SNX4 funciona en vías dinámicas de tráfico de membranas, las condiciones de fijación y permeabilización para inmunofluorescencia pueden requerir optimización, aunque esta aplicación no está especificada para este producto.

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