Anticuerpo Policlonal de Conejo contra DiMetil-Simétrica-Histona H3-R2 (Q16695/P68431) para WB, IHC, IF, ELISA, ChIP-seq

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es una de las proteínas histonas principales, junto con H2A, H2B y H4, formando la partícula central del nucleosoma. Los nucleosomas envuelven y compactan el ADN en cromatina, desempeñando un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Tanto la histona H3.1 (codificada por múltiples genes incluyendo H3C1, H3C2, etc.) como H3.1t (codificada por H3-4) se expresan en células humanas, encontrándose H3.1t predominantemente en células testiculares. Referencias relacionadas: UniProt Q16695

Las histonas sufren una gran variedad de modificaciones postraduccionales (PTM), incluyendo acetilación, metilación, fosforilación, citrulinación y más, conocidas colectivamente como el "código de histonas". Estas modificaciones regulan la estructura de la cromatina y la expresión génica. Entre ellas, la dimetilación simétrica de residuos de arginina es catalizada por metiltransferasas de arginina de proteínas como PRMT5. Por ejemplo, se ha reportado la dimetilación simétrica en la arginina 9 de la histona H3 (H3R9me2s). Este anticuerpo reconoce específicamente la arginina 2 dimetilada simétrica (H3R2me2s), una modificación que puede desempeñar un papel en la regulación epigenética. Referencias relacionadas: UniProt Q16695

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético dimetilado simétrico alrededor de R2, asegurando una alta especificidad para la modificación H3R2me2s. Al realizar transferencias Western (Western blotting), los extractos nucleares enriquecidos en histonas o las histonas extraídas con ácido pueden mejorar la detección.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P) e inmunofluorescencia (IF/ICC), las condiciones de recuperación de antígenos y permeabilización deben optimizarse para cada tejido o tipo celular.
• En experimentos de ChIP-seq, considere incluir reacciones de control como ADN de entrada, control IgG y posiblemente competencia de péptidos para confirmar la especificidad de unión. Los controles de "spike-in" pueden ser útiles para la normalización cuantitativa.
• Los enfoques basados en ELISA se pueden utilizar para la detección cuantitativa de los niveles de H3R2me2s en lisados celulares o preparaciones de histonas purificadas; asegure una carga de proteína consistente y considere usar un anticuerpo pan-H3 para la normalización.
• Se reporta reactividad cruzada para humano, ratón, rata y otras especies (rango amplio predicho). Sin embargo, se recomienda la validación en su sistema de muestra específico.

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