pAb de conejo para Histona H3-R26 Dimetilada Simétrica (Q16695/P68431) para WB, IF/ICC, ELISA

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Contexto Biológico: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Los nucleosomas envuelven y compactan el ADN, restringiendo el acceso al material genético y regulando así procesos esenciales como la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La regulación dinámica de la accesibilidad al ADN se logra mediante una compleja red de modificaciones postraduccionales (MPT) en las histonas, a menudo denominada el "código de histonas", así como por el remodelado de nucleosomas. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

La histona H3 se localiza predominantemente en el núcleo y se asocia a los cromosomas. Se expresa en diversas isoformas; por ejemplo, la variante H3.1t (codificada por H3-4) presenta expresión específica de testículo, mientras que la H3.1 canónica está presente de forma ubicua en células somáticas. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

La cola N-terminal de la histona H3 está sujeta a numerosas MPT, que incluyen acetilación, metilación (lisina y arginina), fosforilación, citrulinación y otras. Los estados específicos de metilación (por ejemplo, dimetilarginina simétrica/asimétrica, mono-, di- o trimetilllisina) en residuos definidos actúan como sitios de unión para proteínas efectoras, influyendo en la estructura de la cromatina y en los resultados de la expresión génica. La metilación de arginina, como la dimetilación simétrica mediada por PRMT5, está implicada en la regulación transcripcional y la organización del genoma. Referencias relacionadas: PMID:17898714, PMID:18077460, PMID:19608861

La alta conservación evolutiva de la histona H3 entre especies sustenta la amplia reactividad cruzada de los anticuerpos generados contra secuencias humanas, lo que los convierte en herramientas valiosas para estudiar la biología de la cromatina en múltiples organismos modelo. Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó utilizando un péptido sintético dimetilado simétrico que incluye la arginina 26 (R26) de la histona H3 humana. Se espera que reconozca específicamente la marca de dimetilación simétrica en esta posición.
• Para Western blot (WB), se observa típicamente una banda de aproximadamente 15 kDa. Considere la posibilidad de utilizar extractos nucleares o histonas extraídas con ácido para enriquecer el objetivo.
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), asegúrese de utilizar protocolos adecuados de fijación y permeabilización celular para permitir que el anticuerpo acceda a la cromatina nuclear. Un control positivo con estados conocidos de modificación H3R26me2s puede ayudar a la interpretación.
• Para ELISA, el anticuerpo se puede utilizar para detección directa o en formato sándwich. Valide el ensayo con el péptido inmunógeno y los controles adecuados.
• Dado que el inmunógeno es un péptido, la preadsorción con el péptido no metilado o dimetilado asimétrico puede ayudar a confirmar la especificidad, aunque esto debe validarse en el sistema de muestra correspondiente.
• La reactividad cruzada prevista de forma amplia sugiere utilidad en humano, ratón, rata y potencialmente otras especies; sin embargo, es recomendable verificar el rendimiento en la especie específica de interés.

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