Anticuerpo Policlonal de Conejo contra Histona H3-R8 Simétricamente Dimetilada (Q16695/P68431) para WB, ELISA, ChIP

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina, limitando así la accesibilidad del ADN a las maquinarias celulares. Las histonas juegan un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se regula a través de un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (PTM) de las histonas, también conocido como el código de histonas, y el remodelado de nucleosomas. Referencias relacionadas: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

La histona H3.1 canónica (codificada por múltiples genes como HIST1H3A-J) se expresa de manera ubicua, mientras que la variante específica de testículo H3.1t (codificada por H3-4/HIST3H3) se encuentra principalmente en células testiculares. Este anticuerpo se dirige a la dimetilación simétrica en la arginina 8 (R8) de la histona H3, una modificación catalizada por la proteína arginina metiltransferasa 5 (PRMT5). La dimetilación simétrica en H3R8 se ha relacionado con la represión transcripcional y el remodelado de la cromatina, contribuyendo a la regulación dinámica de la expresión génica. Referencias relacionadas: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

La modificación ocurre en la cola N-terminal de la histona H3, una región rica en PTM reguladoras, incluyendo acetilación, metilación, fosforilación y otras. La interacción de estas marcas gobierna la estructura y función de la cromatina, haciendo que anticuerpos sitio-específicos como este anti-H3R8 simétricamente dimetilada sean invaluables para la investigación epigenética. Referencias relacionadas: UniProtKB: Q16695, UniProtKB: P68431

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético simétricamente dimetilado alrededor de la R8 de la histona H3 humana, diseñado para reconocer específicamente la marca de dimetilación simétrica. Al usar este anticuerpo en western blot (WB), considere que el peso molecular predicho de la histona H3 es de aproximadamente 15 kDa. Asegure una extracción nuclear completa para una detección óptima.
• Para ELISA, se puede usar el recubrimiento directo del péptido sintético o extractos de nucleosomas para validar la unión del anticuerpo. Siempre incluya péptidos control apropiados (no modificados, asimétricamente dimetilados u otros estados de metilación) para confirmar la especificidad.
• En inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), este anticuerpo puede ser adecuado para el enriquecimiento de regiones genómicas asociadas con H3R8 simétricamente dimetilada. Las condiciones de entrecruzamiento y sonicación deben optimizarse para su tipo celular específico y loci diana.
• Debido a la amplia reactividad cruzada predicha (humano, ratón, rata y otros), es recomendable validar el anticuerpo en el sistema de muestra relevante antes de experimentos a gran escala. Las variaciones de secuencia específicas de especie cerca de la R8 podrían influir en la afinidad de unión; consulte la secuencia específica de la histona H3 para su organismo de interés.
• Como con cualquier anticuerpo específico de modificación, puede ocurrir variabilidad de lote a lote. Siempre titula el anticuerpo para determinar la dilución de trabajo óptima para su ensayo específico.

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