Anticuerpo monoclonal de conejo para Histona H4 dimetilada simétrica en R3 (P62805) para investigación epigenética

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: Función y localización de la Histona H4

La Histona H4 es una de las histonas centrales que constituyen el nucleosoma eucariota, alrededor de la cual se enrolla el ADN para formar la cromatina. Desempeña un papel fundamental en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La modificación postraduccional dinámica de las histonas, denominada frecuentemente "código de histonas", gobierna la accesibilidad del ADN a las proteínas reguladoras y es fundamental para el control epigenético. Referencias relacionadas: UniProt P62805

La Histona H4 se localiza principalmente en el núcleo y se asocia a los cromosomas. Durante la espermatogénesis, la H4 acetilada se localiza en el núcleo de los espermátidas de etapa 11. Referencias relacionadas: UniProt P62805

La Histona H4 sufre extensas modificaciones postraduccionales, que incluyen acetilación, metilación, fosforilación y otras. La dimetilación simétrica en Arg3 (SDMA-H4R3) es catalizada por las proteína arginina metiltransferasas PRMT5 y PRMT7 y está implicada en la regulación transcripcional. Referencias relacionadas: UniProt P62805

Otras modificaciones incluyen la dimetilación asimétrica y la citrulinación en Arg3, la acetilación en múltiples residuos de lisina (por ejemplo, K5, K8, K12, K16) y la fosforilación en residuos específicos de serina y tirosina. Estas marcas combinatorias definen distintos estados de cromatina. Referencias relacionadas: PMID:11387442 PMID:11448779 PMID:15345777 PMID:16567635 PMID:21724829 PMID:15592455 PMID:20068231

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que cubre los 1-100 aminoácidos del extremo N-terminal de la Histona H4 humana, que incluye el residuo Arg3 que está dimetilado de forma simétrica. Al diseñar los experimentos, asegúrese de verificar la especificidad del anticuerpo para esta modificación usando competición peptídica adecuada o controles mutantes.
• Para la transferencia de Western (WB), considere usar extractos nucleares de líneas celulares humanas o de rata. El peso molecular predicho es de ~11 kDa. Valide el tamaño de la banda y la especificidad en su sistema de muestra.
• Las aplicaciones de inmunofluorescencia (IF/ICC) pueden requerir protocolos estándar de tinción nuclear. La co-tinción con tintes de ADN como DAPI puede ayudar a confirmar la localización nuclear.
• El blot de puntos (DB) y el ELISA se pueden emplear para cuantificar los niveles de H4R3 dimetilado simétrico en preparaciones de histonas o lisados celulares. Estos ensayos son útiles para la cribado de alto rendimiento de inhibidores o activadores de la metilación.

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