Anticuerpo monoclonal de conejo contra peroxidasa tiroidea para IHC-P/ELISA - P07202

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de la peroxidasa tiroidea

• La peroxidasa tiroidea (TPO, por sus siglas en inglés) es una enzima clave en la biosíntesis de hormonas tiroideas, que cataliza la yodación y el acoplamiento de tirosinas hormonogénicas en la tiroglobulina para producir las hormonas activas T3 y T4.
• La TPO es una glicoproteína transmembranal localizada en la membrana apical de las células foliculares tiroideas, con su dominio enzimático orientado hacia el lumen folicular.
• La proteína contiene un grupo prostético hemo esencial para su actividad peroxidasa, además de sitios de unión a calcio y hierro, enlaces disulfuro y dominios similares al EGF que contribuyen a su estabilidad estructural.
• Se han identificado múltiples variantes de empalme de la TPO, algunas de las cuales pueden producir isoformas secretadas o con diferente localización, aunque la forma de longitud completa unida a membrana es la predominante.
• La TPO es un autoantígeno importante en las enfermedades tiroideas autoinmunes como la tiroiditis de Hashimoto y la enfermedad de Graves, y las mutaciones en el gen de la TPO pueden causar hipotiroidismo congénito.
• El registro de UniProt clasifica a la TPO como peroxidasa, oxidoreductasa y proteína de biosíntesis de hormonas tiroideas, con evidencia a nivel proteico obtenida de la identificación por proteómica.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen N-glicosilación, que es importante para el plegamiento correcto y la actividad enzimática.
• La expresión de TPO está prácticamente restringida a la glándula tiroides, por lo que es un marcador específico para tejido tiroideo en inmunohistoquímica.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno se diseñó contra la región N-terminal (aminoácidos 1-100) de la TPO humana, por lo que puede dirigirse a un epitopo conservado entre humano, ratón y rata.
• Para IHC-P, los métodos de recuperación de antígeno como la recuperación de epitopos inducida por calor en tampón de citrato (pH 6,0) suelen ser beneficiosos para proteínas de membrana; valide el procedimiento en su tipo de tejido específico.
• En ELISA, utilice TPO recombinante o fracciones purificadas de tiroglobulina como antígeno de recubrimiento; considere bloquear con leche desnatada o BSA para reducir la señal de fondo.
• Dado que el anticuerpo es monoclonal, se espera consistencia entre lotes; sin embargo, las diluciones de trabajo óptimas deben determinarse experimentalmente para cada aplicación y sistema de muestra.
• La reactividad cruzada con ratón y rata ha sido confirmada, lo que permite su uso en modelos de investigación de tiroides en roedores; verifíquela mediante Western blot o IHC en los tejidos relevantes.

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