Anticuerpo policlonal de conejo anti-TLR4 para WB, IF/ICC, ELISA - O00206

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de TLR4

• El receptor tipo Toll 4 (TLR4) es un receptor transmembrana de reconocimiento de patrones que reconoce patrones moleculares asociados a patógenos y daños (PAMP y DAMP) para iniciar respuestas inmunitarias innatas. Referencias relacionadas: PMID:10835634 PMID:15809303 PMID:16622205
• En la membrana plasmática, TLR4 coopera con LY96 (MD-2) para mediar la respuesta inmunitaria innata al lipopolisacárido bacteriano (LPS). Referencias relacionadas: PMID:27022195
• TLR4 transmite señales a través de MYD88 y TIRAP, lo que conduce a la activación de NF-kappa-B y a la secreción de citocinas proinflamatorias, mientras que la internalización mediada por CD14 activa una vía independiente de MYD88 a través de TICAM1-TBK1-IRF3 para la producción de interferón de tipo I. Referencias relacionadas: PMID:10835634 PMID:21393102 PMID:27022195 PMID:14517278
• En complejo con TLR6, TLR4 promueve la inflamación en monocitos/macrófagos y desencadena la internalización y señalización inducidas por ligandos para la producción de citocinas específicas. Referencias relacionadas: PMID:23880187
• TLR4 también participa en respuestas inflamatorias independientes de LPS desencadenadas por ácidos grasos libres y Ni(2+), e inicia la activación del inflamasoma NLRP3. Referencias relacionadas: PMID:20711192 PMID:32894580
• A nivel subcelular, TLR4 se localiza en la membrana celular, los endosomas tempranos y las proyecciones celulares, como las ondulaciones de membrana.
• TLR4 se expresa en gran medida en la placenta, el bazo y los leucocitos de sangre periférica, y se detecta en monocitos, macrófagos, células dendríticas y células T; también se expresa en células de cáncer pancreático. Referencias relacionadas: PMID:9237759 PMID:9435236 PMID:27022195 PMID:36232715
• La proteína contiene repeticiones ricas en leucina, un enlace disulfuro y está glucosilada; pertenece a la familia de receptores tipo Toll y desempeña un papel fundamental en la inmunidad innata y las respuestas inflamatorias.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a los aminoácidos 27-228 del TLR4 humano y cubre el dominio extracelular de repeticiones ricas en leucina; esta región es esencial para el reconocimiento de ligandos y la dimerización del receptor.
• Para la transferencia Western (WB), se espera una banda cercana a 96 kDa; sin embargo, la glucosilación y la posible dimerización pueden producir especies con un peso molecular ligeramente superior. Valide el resultado utilizando controles positivos adecuados (por ejemplo, células THP-1 o lisados de esplenocitos).
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica (IF/ICC), TLR4 puede detectarse en la membrana celular, los endosomas y las ondulaciones de membrana. Optimice las condiciones de fijación y permeabilización para su tipo celular; considere la tinción conjunta con marcadores de estos compartimentos.
• Para ELISA, el anticuerpo puede utilizarse para capturar o detectar TLR4; confirme su rendimiento con proteína recombinante o lisados celulares de origen humano o de ratón.
• Al ser un anticuerpo policlonal, puede reconocer múltiples epítopos, lo que puede mejorar la sensibilidad de detección, pero también puede presentar un fondo más elevado; se recomienda optimizar la titulación y el bloqueo.
• Se indica reactividad cruzada con TLR4 humano y de ratón; verifique la reactividad en su sistema experimental específico si utiliza otras especies.

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