Anticuerpo monoclonal de conejo anti-Topoisomerasa II alfa/TOP2A para WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P11388

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Topoisomerasa II alfa

• La ADN topoisomerasa 2-alfa (TOP2A) es una enzima descaténante clave que altera la topología del ADN generando roturas de doble cadena transitorias, pasando una cadena intacta a través de la rotura y religándola. Referencias relacionadas: PMID:17567603 PMID:18790802 PMID:22013166
• Esta enzima es esencial para resolver enredos y superenrollamientos del ADN que surgen durante la replicación, transcripción, segregación cromosómica y otros procesos que requieren manipulación topológica del ADN.
• TOP2A es miembro de la familia de topoisomerasas tipo II y existe como un homodímero; también se conoce como isoenzima ADN topoisomerasa II alfa.
• La proteína se localiza en el citoplasma, el nucleoplasma y el nucléolo, en consonancia con sus funciones en el metabolismo del ADN nuclear y la organización de los cromosomas mitóticos.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen acetilación, fosforilación y ubiquitinación, como indican las palabras clave de UniProt; estas modificaciones pueden regular la actividad enzimática, la estabilidad y la localización celular.
• TOP2A se expresa ampliamente en tejidos como amígdala, bazo, ganglio linfático, timo, piel, páncreas, testículo, colon, riñón, hígado, cerebro y pulmón. Se observa una expresión elevada en linfomas de alto grado, tumores pulmonares de células escamosas y seminomas.
• También puede desempeñar un papel en la regulación del ritmo circadiano al influir en la duración del período de oscilación transcripcional de BMAL1 (Por similitud).

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético que se corresponde con los aminoácidos 1431-1531 dentro de la región C-terminal de TOP2A humana, una región que puede conferir especificidad de isoforma. Considere verificar la especificidad mediante controles de knockdown o knockout.
• Para Western blot, el peso molecular predicho de TOP2A es aproximadamente 174 kDa. Utilice un gel de acrilamida de bajo porcentaje (por ejemplo, 6-8%) y tiempos de transferencia prolongados para un blotting eficiente de esta proteína de alto peso molecular.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC) e inmunohistoquímica (IHC-P), se esperan patrones de tinción nuclear y nucleolar. Valide comparando con tejidos positivos conocidos como amígdala, bazo o linfomas de alto grado.
• Para ELISA, asegúrese de que el antígeno de recubrimiento presente adecuadamente la región del epítopo; los ensayos de competición con péptido pueden ayudar a confirmar la especificidad de unión.
• Como anticuerpo monoclonal de conejo recombinante, ofrece alta afinidad y reproducibilidad; sin embargo, las diluciones de trabajo óptimas deben determinarse empíricamente para cada ensayo y tipo de muestra.

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