Anticuerpo monoclonal de conejo TriMetil-Histona H3-K27 (Q16695/P68431) para ChIP, CUT&Tag y WB

Especificaciones y parámetros principales del producto

Información biológica: Función y localización de TriMetil-Histona H3 (K27)

La histona H3 es una proteína histona central que, junto con H2A, H2B y H4, forma el nucleosoma, la unidad repetitiva fundamental de la cromatina. Como componente central del nucleosoma, la histona H3 enrolla el ADN, lo condensa en cromatina y regula el acceso a la información genética subyacente. Esta función estructural es fundamental para mantener la estabilidad cromosómica y controlar procesos nucleares clave como la transcripción, la replicación del ADN y la reparación del ADN.

La histona H3 está sujeta a una gran variedad de modificaciones postraduccionales (MPT) en su cola N-terminal flexible, que incluyen metilación, acetilación, fosforilación y citrulinación. Estas modificaciones, a menudo denominadas "código de histonas", regulan dinámicamente la estructura y función de la cromatina. La trimetilación específica de la lisina 27 (H3K27me3) es una marca represora bien caracterizada, depositada por el complejo represivo policomb 2 (PRC2) y está asociada al silenciamiento génico, la inactivación del cromosoma X y la regulación del desarrollo.

La variante H3.1 (UniProt P68431) se expresa de forma generalizada y constituye la mayor parte de la histona H3 en células somáticas, mientras que H3.1t (H3-4, UniProt Q16695) se expresa principalmente en células testiculares. Ambas variantes se localizan en el núcleo y el cromosoma, donde participan en el ensamblaje de nucleosomas y la organización de la cromatina.

Referencias relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Guía experimental y consejos técnicos

• Información del inmunógeno: El anticuerpo se obtuvo a partir de un péptido sintético trimetilado que abarca la lisina 27 (K27) de la Histona H3 humana. Este diseño garantiza un reconocimiento específico de la modificación H3K27me3. Para aplicaciones que requieren discriminar entre diferentes estados de metilación, valide la especificidad mediante ensayos de competición con péptidos.
• Western Blot (WB): El peso molecular predicho de la histona H3 es de aproximadamente 15 kDa. Utilice porcentajes de gel adecuados (por ejemplo, SDS-PAGE al 15%) para obtener una separación óptima. Incluya controles positivos y negativos (por ejemplo, células tratadas con inhibidores de EZH2 para reducir H3K27me3) para confirmar la especificidad de la banda.
• ChIP y CUT&Tag: Este anticuerpo es adecuado para ensayos de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) y CUT&Tag para mapear la distribución de H3K27me3 en todo el genoma o en loci específicos. Optimice la concentración del anticuerpo para cada cantidad de entrada de cromatina e incluya controles de IgG adecuados.
• ELISA: Utilice el péptido utilizado para la inmunización como control positivo para generar curvas de calibración. Tenga en cuenta que el anticuerpo puede presentar reacción cruzada con péptidos que contienen motivos trimetilados similares; valídelo en el sistema de muestra correspondiente.

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