Anticuerpo monoclonal de conejo TriMetil-Histona H3-K36 (K36me3), Q16695/P68431 – WB, ChIP-seq, IHC-P

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

• La histona H3 es un componente central del nucleosoma, envolviendo el ADN en cromatina y desempeñando un papel fundamental en la regulación de la transcripción, reparación del ADN, replicación y estabilidad cromosómica. Referencias relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431
• La proteína se localiza en el núcleo y los cromosomas. Referencias relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431
• La histona H3.1t (codificada por H3-4/HIST3H3, acceso Q16695) es específica de testículos, mientras que la H3.1 canónica (P68431) se expresa de forma ubicua.
• La cola N-terminal de la histona H3 está sujeta a extensas modificaciones postraduccionales (PTM), como metilación, acetilación, fosforilación y otras, que constituyen el "código de histonas" que regula la dinámica de la cromatina. Referencias relacionadas: PMID:16267050, PMID:17194708
• La metilación de residuos de lisina como K36 está asociada con la elongación activa de la transcripción y a menudo se encuentra enriquecida en los cuerpos de los genes. La trimetilación en K36 (H3K36me3) sirve como plataforma de unión para varias proteínas lectoras involucradas en la transcripción y el empalme. Referencias relacionadas: PMID:16267050
• Este anticuerpo, generado contra un péptido sintético trimetilado alrededor de K36, reconoce específicamente la modificación K36me3, permitiendo el estudio detallado de esta marca epigenética.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno para este anticuerpo es un péptido sintético trimetilado correspondiente a los residuos alrededor de K36 de la Histona H3 humana. Al realizar ensayos, considere incluir un péptido no metilado o un péptido con un estado de metilación diferente como control negativo para confirmar la especificidad.
• Para Western blot (WB), las histonas extraídas con ácido o lisados celulares totales son tipos de muestra adecuados. El tamaño de banda esperado es de ~15 kDa. Optimice la carga y la dilución del anticuerpo para su sistema específico.
• Este anticuerpo es adecuado para ChIP y ChIP-seq; siga los protocolos estándar de preparación y fragmentación de cromatina, y considere usar controles de "spike-in" para la normalización.
• Se predice reactividad cruzada para una amplia gama de especies más allá de humano, ratón y rata debido a la alta conservación de secuencias. Sin embargo, se recomienda la validación en la especie de interés.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), la recuperación de antígeno y las condiciones de detección pueden requerir optimización.

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