Anticuerpo monoclonal de conejo TriMetil-Histona H3-K4 (Q16695/P68431) para ChIP-Seq, CUT&Tag, WB

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la Histona H3

Las histonas son proteínas básicas altamente conservadas que sirven como componentes centrales de los nucleosomas, las unidades fundamentales de la cromatina. La histona H3 es una de las cinco principales proteínas histonas involucradas en la estructura de la cromatina en células eucariotas. Junto con H2A, H2B y H4, forma el octámero de histonas alrededor del cual se envuelven aproximadamente 147 pares de bases de ADN, compactando el genoma y regulando la accesibilidad a la maquinaria transcripcional.

La dinámica del nucleosoma, incluidas las modificaciones postraduccionales (PTM) en las colas de las histonas, juega un papel crucial en la regulación epigenética. La histona H3 está sujeta a numerosas modificaciones como metilación, acetilación, fosforilación y más, que en conjunto constituyen el "código de histonas" que gobierna la estructura de la cromatina y la expresión génica.

Entre estas PTM, la trimetilación de la lisina 4 en la histona H3 (H3K4me3) es un sello distintivo de la transcripción activa. Se encuentra predominantemente en los promotores de genes transcritos activamente y está involucrada en el reclutamiento de complejos de remodelación de cromatina y factores de transcripción. El anticuerpo descrito aquí reconoce específicamente la forma trimetilada de H3K4. Esta modificación está mediada por metiltransferasas como los complejos MLL y se asocia con la activación génica. Referencias relacionadas: PMID:16267050 PMID:16457588 PMID:17194708

La histona H3.1t (codificada por el gen H3-4, acceso Q16695) es una variante específica de testículo de la histona H3.1, expresada en células testiculares. La histona H3.1 canónica (acceso P68431) se expresa en la mayoría de los tejidos y está codificada por múltiples genes. Ambas variantes comparten una alta similitud de secuencia y son componentes centrales del nucleosoma.

La localización subcelular es exclusivamente nuclear, asociada con los cromosomas.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• Este anticuerpo se generó contra un péptido sintético correspondiente a la lisina 4 trimetilada de la Histona H3 humana. Para aplicaciones como ChIP-seq, CUT&Tag o IF, considere incluir un control negativo utilizando péptido no trimetilado o un control de isotipo para confirmar la especificidad.
• Se predice que el anticuerpo tendrá una amplia reactividad cruzada debido a la alta conservación de la cola N-terminal de H3 entre especies. Sin embargo, se recomienda la validación en el sistema experimental relevante.
• Para Western blotting, se debe detectar una banda alrededor de 15 kDa correspondiente a la histona H3. Asegure una extracción adecuada de las histonas, particularmente al analizar estados de metilación.
• En ensayos de ChIP, el corte óptimo de la cromatina y la titulación del anticuerpo deben determinarse empíricamente.
• Para aplicaciones cuantitativas como ELISA o DB, considere usar una curva estándar con cantidades conocidas de péptido trimetilado.
• El anticuerpo puede usarse en ensayos multiplexados con otros anticuerpos de modificación de histonas para estudiar el código de histonas de manera combinatoria.

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