Anticuerpo policlonal de conejo contra TriMetil-Histona H3-K56 (Q16695/P68431) para WB, IF/ICC, ELISA, ChIP-seq

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la Histona H3 (H3.1/H3.1t)

• La Histona H3 es un componente central del nucleosoma, que enrolla y compacta el ADN en cromatina para limitar la accesibilidad al ADN. Desempeña un papel central en la regulación de la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica.
• La accesibilidad al ADN está regulada por un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (MPT) en las histonas, denominado colectivamente código de histonas. Estas MPT son leídas por proteínas efectoras que median cambios en el estado de la cromatina y resultados en la expresión génica.
• La trimetilación de la lisina 56 (K56me3) es una MPT específica ubicada en el dominio globular de la H3. Esta modificación puede influir en las interacciones entre histona y ADN dentro del nucleosoma y está implicada en la respuesta al daño del ADN y la dinámica de la cromatina durante la replicación.
• La histona canónica H3.1 se expresa de forma ubicua, mientras que la variante H3.1t (codificada por H3-4/HIST3H3) presenta una expresión específica de testículo.
• Ambas isoformas se localizan en el núcleo y se asocian a los cromosomas, lo que coincide con su papel estructural en la organización de la cromatina.

Referencias relacionadas:

• Identificación de H3K56me3 por espectrometría de masas PMID:17194708
• Papel de EHMT2 (G9a) en la metilación de K56 PMID:22387026
• Composición de la partícula central del nucleosoma y modificaciones de histonas (revisión) Entrada UniProt

Guía experimental y consejos técnicos

• Considere realizar un ensayo de competición con péptidos tanto trimetilados como no modificados de K56 para confirmar la especificidad del anticuerpo por la marca K56me3, especialmente al trabajar con muestras biológicas complejas.
• Para transferencia Western (WB), valide la banda observada en el peso molecular esperado de 15 kDa utilizando extractos nucleares de la especie de interés, e incluya controles de carga y marcadores de peso molecular apropiados.
• En experimentos de ChIP-seq, incluya una reacción de control con un péptido no modificado o una muestra bloqueada con anticuerpo para descartar enriquecimiento no específico. Se predice reactividad cruzada en un amplio rango de especies debido a la alta conservación de secuencia de la histona H3, pero se recomienda la validación experimental en la especie objetivo.
• Para aplicaciones de IF/ICC, considere la co-tinción con marcadores de cromatina o subestructuras nucleares específicas para confirmar la localización espacial de la señal.

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