TrkB Rabbit pAb para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q16620

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de TrkB

• Codificado por el gen NTRK2, TrkB (receptor de factores de crecimiento BDNF/NT-3, receptor tipo 2 de tirosina quinasa neurotrófica) es un receptor de tirosina quinasa que sirve como receptor de alta afinidad para el factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) y la neurotrofina-4 (NTF4), y se une a la neurotrofina-3 (NTF3) con menor afinidad (PubMed:15494731, PubMed:7574684). El splicing alternativo genera múltiples isoformas, incluyendo la TrkB de longitud completa con actividad quinasa, la truncada TrkB-T1 y la TrkB-T-Shc de unión a Shc. Referencias relacionadas: PMID:15494731 PMID:7574684
• Tras la dimerización inducida por ligando y la autofosforilación, TrkB recluta y activa efectores descendentes como SHC1, FRS2, SH2B1, SH2B2 y PLCG1. Esto desencadena la cascada GRB2-Ras-MAPK (diferenciación neuronal y crecimiento de neuritas), la vía PI3K-AKT1 (crecimiento y supervivencia celular) y la señalización PLCG1-PKC (plasticidad sináptica).
• A través de PLCG1, TrkB también activa NF-kappa-B, promoviendo la transcripción de genes de supervivencia y suprimiendo la anoikis. Puede mediar la señalización de calcio dependiente de neurotrofinas en células gliales.
• La localización subcelular incluye la membrana celular, membranas de endosomas/endosomas tempranos, proyecciones axonales y dendríticas, citoplasma perinuclear y densidad postsináptica.
• En el SNC, TrkB se expresa en la corteza cerebral, hipocampo, tálamo, plexo coroideo, cerebelo, tronco encefálico y médula espinal. En el SNP, se encuentra en ganglios craneales, ganglios de la raíz dorsal y nervios sensoriales. TrkB-T1 también se detecta en páncreas, riñón y corazón, mientras que TrkB-T-Shc es predominantemente neuronal.
• Las modificaciones postraduccionales incluyen glicosilación N-ligada, formación de enlaces disulfuro y fosforilación de tirosina dependiente de ligando. Palabras clave: glicoproteína, fosfoproteína, quinasa, transmembrana, splicing alternativo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno cubre los aminoácidos 32–430 de TrkB humano, correspondientes al dominio extracelular. Se espera que esta región reconozca todas las isoformas que comparten la región extracelular.
• Para Western blotting, el peso molecular predicho de TrkB de longitud completa es de 92 kDa; sin embargo, la glicosilación puede resultar en un desplazamiento de la banda hacia un peso molecular aparente mayor. Se recomienda un SDS-PAGE reductor y membrana de PVDF.
• En inmunofluorescencia/ICC e IHC-P, los métodos de recuperación de antígenos pueden mejorar la detección, especialmente en tejidos fijados en formol e incluidos en parafina. Valide el anticuerpo en muestras de control positivo apropiadas (p. ej., tejido cerebral, líneas celulares neuronales) e incluya controles sin anticuerpo primario.
• Dado que este es un anticuerpo policlonal, se debe verificar la consistencia entre lotes para aplicaciones cuantitativas críticas. Considere usarlo como anticuerpo de captura o detección en ELISA con una optimización adecuada del emparejamiento.

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