Anticuerpo policlonal de conejo UBE2K para WB, ELISA - P61086

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de UBE2K

• UBE2K (enzima conjugadora de ubiquitina E2 K, también conocida como HIP2, E2-25K) es una enzima E2 que acepta ubiquitina del complejo E1 y cataliza su unión covalente a las proteínas sustrato, desempeñando un papel central en el sistema ubiquitina-proteasoma.
• Cataliza la síntesis de cadenas de poliubiquitina unidas por Lys-48, que normalmente dirigen las proteínas a la degradación por el proteasoma. Esta enzima media la degradación selectiva de proteínas de vida media corta y proteínas anormales, incluidas las implicadas en la degradación asociada al retículo endoplásmico (ERAD).
• UBE2K ubiquitina la huntingtina, la proteína implicada en la enfermedad de Huntington, y contribuye a la formación de células espumosas al promover la degradación de p53, suprimiendo así la apoptosis en macrófagos cargados de lípidos.
• En infecciones virales, UBE2K es secuestrada para la degradación de la cadena pesada del MHC de clase I y la degradación de RB1 dependiente del E7 del VPH, lo que resalta su papel en la evasión inmune y la transformación oncogénica.
• La proteína se localiza principalmente en el citoplasma, lo que concuerda con su función en eventos de ubiquitinación citosólicos.
• UBE2K sufre modificaciones postraduccionales que incluyen acetilación y fosforilación, que pueden regular su actividad; el empalme alternativo genera isoformas adicionales.
• Se expresa de forma ubicua en los tejidos humanos, con una alta expresión en el cerebro, especialmente en la corteza y el cuerpo estriado, regiones afectadas en los trastornos neurodegenerativos.

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a un péptido sintético que abarca los aminoácidos 1-100 de UBE2K humano, dirigido a la región N-terminal. Se espera reactividad contra la proteína de longitud completa (22 kDa) en Western blot.
• Para Western blot, titule el anticuerpo en una dilución entre 1:500 y 1:2000 y optimice las condiciones según su muestra y sistema de detección. Utilice controles positivos (por ejemplo, lisado de células HeLa) y negativos adecuados.
• Este anticuerpo está validado para ELISA; para ELISA indirecta, determine la concentración óptima de antígeno de recubrimiento y la dilución del anticuerpo de forma empírica.
• Dado que la reactividad cruzada solo está confirmada para UBE2K humano, valide el anticuerpo en otras especies si es necesario, ya que la homología de secuencia puede permitir la reactividad cruzada.
• Los anticuerpos policlonales pueden presentar variabilidad entre lotes; incluya estándares de referencia internos para garantizar la reproducibilidad.

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