Anticuerpo policlonal de conejo contra Ubiquityl-Histona H2A-K119 (P04908/P0C0S8) para WB y ELISA

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la histona H2A tipo 1

Función de la histona H2A

La histona H2A es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina. Esta función estructural limita la accesibilidad del ADN y por lo tanto regula de manera central la transcripción, la reparación del ADN, la replicación del ADN y la estabilidad cromosómica. La accesibilidad del ADN se modula a través de un conjunto complejo de modificaciones postraduccionales (MPT) conocido como el "código de histonas" y por la remodelación de nucleosomas.

Localización subcelular

La histona H2A se localiza principalmente en el núcleo y se asocia a los cromosomas.

Modificaciones postraduccionales

La histona H2A sufre numerosas MPT, que incluyen acetilación, fosforilación, citrulinación y ubiquitinación. Las modificaciones específicas anotadas son:

• Acetilación N-terminal en Ser-2.
• Fosforilación en Ser-2 por RPS6KA5.
• Citrulinación en Arg-4.
• En Lis-119, el residuo al que se dirige este anticuerpo, se han identificado múltiples acilaciones: hidroxiisobutirilación, beta-hidroxibutirilación, crotonilación y glutarilación. La palabra clave "Conjugación Ubl" en UniProt confirma que la ubiquitinación también se produce en este sitio.

Referencias relacionadas: PMID:11709551, PMID:15823041, PMID:16457589, PMID:15010469, PMID:24681537, PMID:27105115, PMID:21925322, PMID:31542297

Guía experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético ubiquinado alrededor de K119 del HIST1H2AB humano (UniProt P04908/P0C0S8). Este diseño sugiere especificidad por la forma ubiquinada; verifique la especificidad usando controles adecuados (por ejemplo, comparación con péptido no modificado o lisados de células con ubiquitinación modulada).
• Para Western blot (WB), considere extraer las histonas usando protocolos de extracción ácida para enriquecer las proteínas de histonas. El peso molecular predicho de la forma no modificada es de aproximadamente 14 kDa; la ubiquitinación agrega ~8,5 kDa, por lo que se puede observar una banda alrededor de 23 kDa.
• Para ELISA, se pueden usar formatos directos o de sándwich. Considere recubrir con el péptido ubiquinado o con la histona H2A ubiquinada recombinante para evaluar la unión del anticuerpo.
• Dada la amplia reactividad cruzada predicha (Humana, Ratón, Rata y otras), valide el anticuerpo en su sistema de muestra específico antes de escalar el proceso.

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