UPF1/RENT1 Rabbit pAb - Q92900

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de UPF1/RENT1

• UPF1 (Regulador de transcripciones con sentido erróneo 1), también conocido como RENT1 o hUpf1, es una helicasa de ARN dependiente de ATP y regulador maestro de la degradación del ARNm mediada por codones de terminación prematura (NMD), una vía de vigilancia que degrada los ARNm que albergan codones de terminación prematura. Referencias relacionadas: PMID:11163187 PMID:16086026 PMID:18172165

• La enzima cataliza la desenrollamiento dependiente de ATP de dúplex ARN:ADN, ARN:ARN y ADN:ADN en dirección 5'-3', con el ADN de cadena simple estimulando fuertemente su actividad ATPasa. Referencias relacionadas: PMID:10999600 PMID:18066079 PMID:21419344 PMID:23275559 PMID:26138914 PMID:30218034

• Tras la terminación de la traducción, UPF1 se recluta en ribosomas estancados y cicla entre estados fosforilados y defosforilados; su fosforilación por SMG1 es un interruptor crítico que desencadena la NMD. Referencias relacionadas: PMID:11544179 PMID:19417104 PMID:25220460

• En la vía canónica dependiente de EJC, UPF1 se ensambla en un complejo heterotrimérico SURF y luego con UPF2/UPF3 para formar el complejo de vigilancia activo, que dirige los ARNm objetivo para la degradación exonucleolítica y endonucleolítica. Referencias relacionadas: PMID:21419344 PMID:12554878

• UPF1 additionally opera en vías NMD alternativas de forma independiente a UPF2/UPF3 y media la degradación del ARNm de histonas dependiente de la replicación al final de la fase S. Referencias relacionadas: PMID:16086026 PMID:18172165 PMID:18447585

• La proteína se localiza en el citoplasma, los cuerpos de procesamiento (P-bodies), el núcleo y la región perinuclear.

• UPF1 se expresa de forma ubicua, contiene dominios de dedo de zinc y está sujeto a modificaciones postraduccionales que incluyen fosforilación, metilación e isomerización.

Guía experimental y consejos técnicos

• Dado que el inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aa 819–1118), se espera que el anticuerpo reconozca todas las isoformas de UPF1 y sea adecuado para detectar variantes de longitud completa y truncadas en WB e IP.
• Para western blot, el peso molecular predicho es de ~124 kDa; use condiciones reductoras y valide con los controles positivos (p. ej., HeLa, HEK293) y negativos apropiados.
• En inmunofluorescencia/ICC, UPF1 generalmente muestra un patrón citoplasmático difuso y nuclear punteado; puede ser necesario optimizar las condiciones de permeabilización.
• La reactividad cruzada reportada con ratón y rata hace que este anticuerpo sea útil para estudios en modelos de roedores, pero se recomienda la validación en el sistema de muestras específico.
• Para aplicaciones de ELISA e IP, la naturaleza policlonal puede proporcionar una alta sensibilidad, aunque es aconsejable la titulación y la optimización del bloqueo.

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