Anticuerpo Monoclonal de Conejo USP9X para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q93008

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de USP9X

• USP9X (Hidrolasa ubiquitina carboxi-terminal 9X), también conocida como FAF, FAM, hFAM, DFFRX, MRX99, es una enzima deubiquitinasa grande codificada por el gen USP9X ubicado en el cromosoma X. Pertenece a la familia de peptidasas C19 de proteasas específicas de ubiquitina.
• Actuando como una proteasa de tioles, USP9X hidroliza específicamente cadenas de poliubiquitina con preferencia por los enlaces Lys-11, seguidos por los enlaces Lys-63, Lys-48 y Lys-6, eliminando así la ubiquitina de las proteínas objetivo y regulando el recambio de proteínas. Referencias relacionadas: PMID:30914461
• USP9X es un componente esencial de la cascada de señalización TGF-beta/BMP, donde desubiquitina SMAD4 monoubiquitinado, oponiéndose a la ligasa E3 de ubiquitina de proteínas TRIM33 y promoviendo la transducción de señales. Referencias relacionadas: PMID:19135894
• En la mitosis, USP9X regula la alineación y segregación cromosómica controlando la localización de BIRC5/survivina en los centrómeros mitóticos, asegurando así una división celular adecuada. Referencias relacionadas: PMID:16322459
• USP9X desubiquitina y estabiliza múltiples proteínas involucradas en la reparación del ADN (ALKBH3), la desmetilación de ARN (ALKBH5) y el ensamblaje del complejo mTORC2 (RICTOR), destacando su papel en el mantenimiento de la homeostasis celular. Referencias relacionadas: PMID:25944111 PMID:37454738 PMID:33378666
• La enzima también participa en la importación de peroxisomas mediante la desubiquitinación de PEX5, restablece el reloj circadiano a través de la estabilización de BMAL1 e inhibe la vía de señalización Hippo mediante la desubiquitinación de AMOTL2. Referencias relacionadas: PMID:22371489 PMID:29626158 PMID:26598551 PMID:34404733
• A nivel subcelular, USP9X se localiza en el citosol, los conos de crecimiento y el axonema del cilio, lo cual es consistente con sus funciones en el desarrollo neuronal y la migración celular.
• Ampliamente expresado en tejidos embrionarios y adultos, las mutaciones en USP9X se asocian con discapacidad intelectual ligada al cromosoma X (MRX99, XLID99), lo que subraya su importancia en el neurodesarrollo.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región N-terminal (aa 1-100) del USP9X humano; el anticuerpo puede reconocer la USP9X de longitud completa, así como cualquier fragmento N-terminal. Considere esto al interpretar los patrones de bandas en el Western blot.
• Debido al alto peso molecular de USP9X (~290 kDa), utilice geles de SDS-PAGE de bajo porcentaje (p. ej., 6%) y tiempos de transferencia húmeda prolongados (p. ej., toda la noche a 4°C) para una resolución y transferencia óptimas en WB.
• Para IHC-P e IF/ICC, se recomiendan técnicas estándar de recuperación de antígenos (mediadas por calor con tampón de citrato o EDTA), pero las condiciones de fijación deben validarse para el tipo de muestra específico.
• En ELISA, el inmunógeno de péptido sintético puede servir como control positivo; sin embargo, la reactividad cruzada con USP9X de ratón y rata debe verificarse si se utilizan muestras de roedores.

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