Anticuerpo policlonal de conejo contra vinculina para WB, IF/ICC y ELISA - P18206

Especificaciones y parámetros principales del producto

Contexto biológico: función y localización de la vinculina

• La vinculina es una proteína de unión a filamentos de actina (F-actina) que desempeña un papel central tanto en la adhesión célula-matriz (adhesiones focales) como en la adhesión célula-célula (uniones adherentes).
• Potencia la mecanosensibilidad al regular la expresión de E-cadherina en la superficie celular y estabilizar el complejo de E-cadherina, contribuyendo a la morfología y la locomoción celular.
• La proteína se localiza en múltiples sitios subcelulares, incluidas las adhesiones focales, las uniones adherentes, los podosomas, el citoesqueleto perinuclear y el sarcolema de las células musculares.
• Una variante de corte y empalme específica del músculo, la metavinculina (MV), surge del corte y empalme alternativo del gen VCL e incorpora un exón adicional, lo que da lugar a una isoforma de mayor tamaño con funciones únicas en el músculo cardíaco y liso.
• Las modificaciones postraduccionales, como la fosforilación, la acetilación y la palmitoilación, regulan la activación, la localización y las interacciones proteicas de la vinculina.
• Las mutaciones en VCL están relacionadas con miocardiopatías, incluidas la miocardiopatía dilatada (CMD1W) y la miocardiopatía hipertrófica (CMH15), lo que pone de relieve su papel fundamental en la integridad del músculo cardíaco.
• La vinculina actúa como un centro de numerosos socios de unión (por ejemplo, talina, α-actinina y paxilina), integrando señales mecánicas y químicas en los sitios de adhesión.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región C-terminal (aminoácidos 751–850), que está conservada entre la vinculina y la metavinculina; por lo tanto, se espera que el anticuerpo reconozca ambas isoformas, salvo que se indique lo contrario.
• Para la transferencia Western, se espera una banda cercana a 124 kDa; valide la especificidad utilizando lisados de líneas celulares humanas, de ratón o de rata que se sepa que expresan vinculina (por ejemplo, HeLa, NIH/3T3 o C2C12).
• En inmunofluorescencia/inmunocitoquímica, optimice la fijación (por ejemplo, con paraformaldehído al 4 %) y la permeabilización para preservar las estructuras de adhesión focal; la tinción conjunta con F-actina o paxilina puede servir como control positivo.
• Para ELISA, considere un formato directo o tipo sándwich; realice experimentos de titulación para determinar las concentraciones óptimas de recubrimiento y anticuerpo para su placa y sistema de detección específicos.
• Al trabajar con tejidos musculares, tenga en cuenta que la metavinculina migra a un peso molecular mayor y puede presentar una expresión diferencial; incluya los controles adecuados.

CamelBio: su puente integral de suministro

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