Anticuerpo policlonal de conejo contra XBP1 para WB, IF/ICC, ELISA - P17861

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de XBP1

• XBP1 existe en dos isoformas principales: la forma no empalmada (XBP1u) actúa como un factor de transcripción débil y regula principalmente la respuesta a proteínas desplegadas (UPR) mediante retroalimentación negativa, mientras que la forma empalmada (XBP1s) es un potente activador transcripcional de genes diana de la UPR. Referencias relacionadas: PMID:8657566 PMID:16461360 PMID:11779464 PMID:25239945
• XBP1 es fundamental para la respuesta a proteínas desplegadas (UPR), se une al elemento de respuesta al estrés del RE (ERSE) y al elemento de la UPR (UPRE) para regular al alza las chaperonas del RE y los componentes de degradación asociados al RE. Referencias relacionadas: PMID:11779464 PMID:25239945
• La producción de XBP1s activo implica el empalme citoplasmático no convencional del ARNm de XBP1 por la endorribonucleasa IRE1α (ERN1) en respuesta al estrés del RE. Referencias relacionadas: PMID:19394296 PMID:21233347 PMID:23529610
• XBP1u proporciona retroalimentación negativa al dirigir XBP1s a la degradación mediada por el proteasoma, evitando la hiperactivación de la UPR. Referencias relacionadas: PMID:16461360 PMID:25239945
• XBP1 se localiza en la membrana del retículo endoplásmico y se traslada al núcleo tras su activación; además, también está presente en el citoplasma.
• En células inmunitarias, XBP1 es esencial para la diferenciación de plasmocitos y la producción de inmunoglobulinas, y se expresa en la sinovia reumatoide. Referencias relacionadas: PMID:11460154
• XBP1 contribuye a la progresión del cáncer: su sobreexpresión en cáncer de mama promueve la transición epitelial-mesenquimal (EMT) y la metástasis mediante la regulación al alza de SNAI1. Referencias relacionadas: PMID:25280941
• En células endoteliales, XBP1 promueve la angiogénesis y proliferación inducidas por VEGF, y regula la autofagia mediante la activación transcripcional de BECN1. Referencias relacionadas: PMID:23529610 PMID:23184933 PMID:19416856

Guía experimental y consejos técnicos

• Basado en el diseño del inmunógeno (proteína recombinante/péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 277–376 de XBP1 humana), este anticuerpo puede reconocer tanto la isoforma no empalmada (~29 kDa) como la empalmada (~55 kDa); se recomienda la validación con controles específicos de isoformas o la inducción de estrés del RE (por ejemplo, con tunicamicina).
• Para Western blot (WB) con este anticuerpo policlonal de conejo, separa las proteínas en condiciones reductoras y espera una banda cerca de los 29 kDa para XBP1u; la inducción de estrés del RE puede desplazar la señal a la isoforma empalmada de mayor tamaño.
• En inmunofluorescencia (IF/ICC), optimiza la fijación (por ejemplo, PFA al 4%) y la permeabilización (por ejemplo, Tritón X-100 al 0,1%) para retener la localización en RE/núcleo; realiza co-tinción con marcadores de orgánulos para confirmar la distribución subcelular.
• Para ELISA, considera usar el anticuerpo como reactivo de captura o detección contra la proteína XBP1 recombinante o lisados celulares; las condiciones de titulación y bloqueo deben optimizarse según el ensayo.
• Se informa de reactividad cruzada con ratón y rata; sin embargo, debe verificarse la homología de secuencia en la región del inmunógeno para tu modelo experimental específico.

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