Anticuerpo Monoclonal de Conejo ZAP70 para WB, IF-P, ELISA - P43403

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ZAP70

• La tirosina-proteína quinasa ZAP-70 (proteína asociada a la cadena zeta de 70 kDa, quinasa de tirosina relacionada con Syk) está codificada por el gen ZAP70 y existe como isoformas empalmadas alternativamente.
• Funciona como una quinasa de señalización esencial en la respuesta inmune adaptativa: regula la activación, proliferación, diferenciación, motilidad, adhesión y expresión de citoquinas de las células T; también contribuye al desarrollo de timocitos y a la activación primaria de células B.
• Tras la estimulación del receptor de células T (TCR), ZAP70 es reclutada hacia los motivos ITAM fosforilados de CD3E y CD3Z en la membrana plasmática, donde es activada por fosforilación mediada por LCK. La ZAP70 activada fosforila las proteínas adaptadoras LAT y LCP2, iniciando cascadas de señalización posteriores. Referencias relacionadas: PMID:7509083
• Media la internalización y degradación del complejo TCR al interactuar con la ligasa de ubiquitina E3 CBL y las adaptadoras SLA/SLA2, modulando la expresión superficial del TCR y la duración de la señalización.
• Localización subcelular: citoplasma y membrana celular; se transloca a la membrana plasmática tras la activación del TCR.
• Especificidad tisular: expresada en células T, células asesinas naturales (NK), timocitos tempranos y células pro/pre B.
• Modificaciones postraduccionales: la fosforilación, acetilación y ubiquitinación regulan su actividad y estabilidad. Contiene dominios SH2 y un dominio quinasa. Palabras clave: estructura 3D, fosfoproteína, conjugación Ubl, enlace isopeptídico, variante de enfermedad, SCID.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es una proteína de fusión recombinante que representa los aminoácidos 550-619 dentro del dominio quinasa C-terminal de ZAP70 humano. Para Western blot, espere una banda específica alrededor de 70 kDa en líneas celulares T humanas (p. ej., Jurkat) o células mononucleares de sangre periférica (PBMC).
• Para inmunofluorescencia (IF-P), se requiere permeabilización para detectar ZAP70 intracelular y asociada a membrana; considere usar activadores de células T para mejorar la señal.
• En aplicaciones ELISA, valide el rendimiento del anticuerpo con proteína ZAP70 recombinante o lisados celulares de muestras de células T relevantes; realice una titulación óptima.
• La reactividad cruzada reportada es para humano. Si prueba otras especies, verifique la conservación de secuencia de la región del inmunógeno, particularmente en el dominio quinasa.

CamelBio: Su Puente de Abastecimiento Integral

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