Anticuerpo policlonal de conejo anti-ADN ligasa III/LIG3 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P49916

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: función y localización de la ADN ligasa III

• La ADN ligasa 3 (LIG3) existe en múltiples isoformas: la isoforma 3 (nuclear) y la isoforma 1 (mitocondrial), con nombres alternativos que incluyen LIG2, LIG3alpha y MTDPS20.
• La isoforma 3 (nuclear) forma un heterodímero con XRCC1 y participa en la reparación de roturas de cadena del ADN y en la corrección del intercambio entre cromátidas hermanas después de daños causados por radiación ionizante y agentes alquilantes. Referencias relacionadas: PMID:10207110 | PMID:24674627
• La isoforma 1 (mitocondrial) funciona como una ADN ligasa en la reparación por escisión de bases mitocondriales (mtBER), proceso fundamental para mantener la integridad del genoma mitocondrial. Referencias relacionadas: PMID:10207110 | PMID:24674627
• La localización subcelular es tanto nuclear como mitocondrial, en consonancia con sus funciones duales en el mantenimiento del ADN genómico y mitocondrial.
• Se expresa predominantemente en los testículos, el timo, la próstata y el corazón, lo que refleja tejidos con altas demandas metabólicas o proliferativas.
• Contiene un dominio de unión a ATP, dos motivos de dedos de zinc y requiere magnesio como cofactor para su actividad ligasa dependiente de ATP.
• Las mutaciones en el gen están asociadas con el síndrome de depleción del ADN mitocondrial 20 (MTDPS20), una enfermedad mitocondrial primaria, lo que subraya su función mitocondrial esencial.
• Participa en procesos celulares más amplios, incluida la replicación del ADN, la recombinación y la progresión del ciclo celular, vinculando la reparación del ADN con la estabilidad del genoma.

Orientación experimental y consejos técnicos

• El inmunógeno abarca los aminoácidos 254–460, una región conservada en las isoformas nuclear y mitocondrial; por lo tanto, el anticuerpo puede reconocer ambas formas.
• Para el análisis por Western blot, se debe esperar una banda dominante cercana a 113 kDa; incluya controles positivos adecuados, como lisados de HeLa, HEK293 o testículo, y valide el resultado en el sistema de muestras correspondiente.
• En IHC-P, considere los métodos de recuperación antigénica y los patrones de expresión específicos de cada tejido; los testículos, el timo, la próstata y el corazón son tejidos positivos adecuados.
• La reactividad cruzada con ratón y rata permite su aplicación en organismos modelo comunes; sin embargo, verifique la reactividad específica de cada especie en su configuración experimental.
• La naturaleza policlonal puede proporcionar una señal robusta, pero se debe evaluar la consistencia entre lotes para los ensayos cuantitativos.
• Para ELISA e IF/ICC, optimice la dilución del anticuerpo primario y las condiciones de detección utilizando controles positivos y negativos conocidos.

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