Anticuerpo policlonal anti-ADN polimerasa eta para WB - Q9Y253

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de la ADN Polimerasa eta

• La ADN polimerasa eta (POLH), también conocida como proteína RAD30A o XP-V, es una ADN polimerasa de la familia Y especializada en la síntesis translésica (TLS) a través de dímeros de pirimidina ciclobutano inducidos por UV y otras lesiones distorsionantes. Referencias relacionadas: PMID:10385124, PMID:11743006, PMID:16357261
• Coopera con el complejo POLZ (REV3L-REV7-POLD2-POLD3) para extender los cebadores después de la evasión de la lesión, insertando uno o dos nucleótidos frente al sitio dañado. Referencias relacionadas: PMID:24449906
• POLH dirige la ADN polimerasa iota (POLI) a los focos de replicación, facilitando una respuesta coordinada al daño. Referencias relacionadas: PMID:12606586
• En sitios abásicos, POLH forma una base de Schiff con el 5′-desoxirribosa fosfato, atrapando covalentemente la enzima e inhibiendo su síntesis de ADN para prevenir la mutagénesis durante la reparación por escisión de bases. Referencias relacionadas: PMID:14630940
• La proteína se localiza en el núcleo y se enriquece en los focos de replicación tras el daño del ADN.
• POLH está sujeta a ubiquitinación, formando enlaces isopeptídicos que modulan su reclutamiento y actividad.
• Las mutaciones en POLH son responsables de la variante de Xeroderma pigmentoso (XP-V), un trastorno recesivo marcado por una extrema sensibilidad a los UV y un alto riesgo de cáncer de piel.
• También juega un papel en la hipermutación somática de los genes de inmunoglobulinas, contribuyendo a la diversidad de anticuerpos. Referencias relacionadas: PMID:11376341, PMID:14734526

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno corresponde a la región central (aa 322–520) de la POLH humana, que contiene dominios conservados críticos para la actividad de la polimerasa y la evasión de lesiones.
• Para Western blot (WB), espere una banda específica de aproximadamente 78 kDa en lisados nucleares de líneas celulares humanas, de ratón o de rata.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC), optimice la fijación y la permeabilización para detectar focos nucleares, que aumentan después del tratamiento con UV.
• Para ELISA, pre-recubra la proteína inmunógena o utilice un enfoque de recubrimiento directo, y considere un paso de bloqueo para minimizar el fondo.
• Valide la especificidad del anticuerpo en muestras con knockout o tratadas con siRNA para confirmar el reconocimiento del objetivo.

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