Anticuerpo policlonal de conejo MonoMetil-Histona H3-K79 (Q16695 / P68431) para WB, ELISA, ChIP

Especificaciones y parámetros principales del producto

Antecedentes biológicos: Función y localización de la MonoMetil-Histona H3

• La histona H3 es un componente central del nucleosoma, que envuelve y compacta el ADN en cromatina. Esta compactación restringe la accesibilidad al ADN, regulando así procesos nucleares fundamentales como la transcripción, la reparación del ADN, la replicación y la estabilidad cromosómica.
• Como actor central en el "código de histonas", H3 sufre numerosas modificaciones postraduccionales específicas de sitio (MPT) —como metilación, acetilación, fosforilación y citrulinación— que ajustan finamente la estructura de la cromatina y la expresión génica. La monometilación en la lisina 79 (K79me1) representa una de estas marcas reguladoras implicadas en el control transcripcional y la memoria epigenética.
• La histona H3 se localiza principalmente en el núcleo y es un componente integral de los cromosomas. Existen múltiples variantes de H3 en humanos: la H3.1 canónica dependiente de la replicación (codificada por varios genes HIST1H3 y P68431) y la H3.1t específica de testículo (Q16695), que se expresa selectivamente en las células testiculares.
• La función precisa de la monometilación de K79 depende del contexto; se ha asociado tanto a entornos de cromatina activos como reprimidos, y su regulación aberrante está ligada a trastornos del desarrollo y cánceres.

Guía experimental y consejos técnicos

• Diseño del inmunógeno: El anticuerpo se generó contra un péptido sintético monometilado correspondiente a los residuos alrededor de K79 de la histona H3 humana (NP_003520.1), lo que garantiza la especificidad por la marca K79me1.
• Western blotting (WB): Para la detección, considere utilizar extractos de proteínas nucleares o histonas extraídas con ácido. Dado el peso molecular predicho de aproximadamente 15 kDa, los protocolos estándar de SDS-PAGE y transferencia son adecuados. Pruebe un rango de diluciones del anticuerpo para optimizar la relación señal-ruido.
• ELISA: Utilice péptidos sintéticos monometilados y tampones de bloqueo adecuados para minimizar la unión no específica. Incluya péptidos no modificados y otros péptidos modificados como controles para confirmar la especificidad.
• Inmunoprecipitación de cromatina (ChIP): Las condiciones de reticulación y la sonicación deben optimizarse cuidadosamente para preservar la marca de metilo y lograr una fragmentación adecuada de la cromatina. Valide el rendimiento del anticuerpo en la especie correspondiente (humano, ratón, rata) y contexto celular.
• Reactividad cruzada: Se predice que el anticuerpo reaccione con una amplia gama de especies debido a la alta conservación de la secuencia de la región H3K79. Valide la especificidad en su sistema experimental utilizando controles positivos y negativos adecuados.

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