Anticuerpo Policlonal de Conejo Anti-ADARB1 para WB, ELISA - P78563

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de ADARB1

• ADARB1 (editasa específica de ARN de doble hebra 1), también conocido como ADAR2, DRADA2 o RED1, es un miembro de la familia de adenosina desaminasa que actúa sobre el ARN (ADAR) que cataliza la desaminación hidrolítica de adenosina a inosina (edición A-a-I) en sustratos de ARN de doble hebra (dsRNA).
• La edición de ARN A-a-I por ADARB1 puede modular la expresión génica a través de múltiples mecanismos, incluyendo la alteración de codones y recodificación de proteínas, la regulación del empalme de pre-ARNm, la modulación de la estabilidad del ARN y la influencia en la biogénesesis y dirigencia de microARN.
• ADARB1 es responsable de la edición selectiva de sitios de transcritos neuronales clave, como los receptores de glutamato (GRIA2 en los sitios Q/R y R/G, GRIK2), el receptor de serotonina (HTR2C), el receptor de GABA (GABRA3) y el canal de potasio voltaje-dependiente (KCNA1), lo que resulta en cambios de aminoácidos que alteran las propiedades de los canales iónicos y receptores.
• La enzima exhibe efectos provirales dependientes e independientes de la edición sobre la replicación del VIH-1: edita directamente el UTR 5' viral y suprime la activación de EIF2AK2/PKR para mejorar la producción viral.
• El empalme alternativo y el uso de promotores alternativos generan múltiples isoformas; la isoforma 1 tiene menor actividad catalítica, mientras que la isoforma 2 muestra mayor actividad catalítica in vitro.
• ADARB1 se localiza principalmente en el núcleo y el nucleolo, lo que es consistente con su función en la modificación del ARN co-transcripcional y postranscripcional.
• La expresión es más alta en el cerebro y el corazón, con niveles más bajos en la placenta, el pulmón, el hígado y el riñón; en astrocitomas pediátricos, la disminución de la actividad de edición de ARN se correlaciona con el grado de malignidad del tumor.
• La proteína contiene dominios de unión a ARN de doble hebra (dsRBD) y un dominio desaminasa con un ión de zinc coordinado, y está regulada por fosforilación. Las asociaciones con enfermedades incluyen discapacidad intelectual (NEDHYMS) y un papel en la inmunidad antiviral innata.

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno utilizado es un fragmento recombinante correspondiente a los aminoácidos 180-380 del ADARB1 humano (NP_001103.1). Esta región se encuentra dentro del dominio catalítico/desaminasa del extremo N-terminal, y los anticuerpos generados contra él pueden detectar el objetivo en condiciones desnaturalizantes y nativas; considere verificar la reactividad en su tipo específico de muestra.
• El peso molecular predicho es de 81 kDa; confirme la migración mediante SDS-PAGE en condiciones reductoras. Las modificaciones postraduccionales o variantes específicas de isoformas pueden desplazar el peso molecular aparente.
• Para el Western blot (WB), use controles positivos apropiados como cerebro humano, corazón o líneas celulares conocidas por expresar ADARB1. La reactividad cruzada con ortólogos de ratón y rata permite su uso en estudios con modelos de roedores.
• Los protocolos de ELISA pueden beneficiarse de la optimización del antígeno de recubrimiento y la titulación del anticuerpo. La naturaleza policlonal puede proporcionar una detección sensible en formatos de ELISA sándwich o indirecto cuando se combina con un anticuerpo monoclonal de captura validado.

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