Anticuerpo monoclonal de conejo anti-PARP1 para IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P09874

Especificaciones y Parámetros Principales del Producto

Antecedentes Biológicos: Función y Localización de PARP1

• PARP1 es una poli-ADP-ribosiltransferasa que media la PARilación de proteínas, principalmente en residuos de serina, y juega un papel clave en la reparación del ADN. Referencias relacionadas: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Inicia la reparación de roturas de ADN reconociendo y uniéndose a roturas de ADN dentro de la cromatina, reclutando HPF1 y catalizando la PARilación de histonas (p.ej., H2BS6ADPr, H3S10ADPr) para descompactar la cromatina y facilitar el acceso de los factores de reparación. Referencias relacionadas: PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625
• PARP1 se acumula en los sitios de daño del ADN con TIMELESS y promueve la reparación por recombinación homóloga de roturas de doble cadena mediante la mediación de la poli-ADP-ribosilación. Referencias relacionadas: PMID:26344098, PMID:30356214
• Predominantemente nuclear (cromatina, nucléolo), PARP1 se transloca dinámicamente al citoplasma tras daño en el ADN o apoptosis, donde regula procesos como la inhibición de la vía cGAS-STING y la apoptosis mediada por AIFM1. Referencias relacionadas: PMID:35460603, PMID:33168626
• PARP1 modula la transcripción uniéndose a nucleosomas y alterando la estructura de la cromatina como la histona H1, actuando tanto como represor como regulador dependiente del contexto de la elongación de la ARN polimerasa II. Referencias relacionadas: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• Durante la apoptosis, PARP1 es escindido por caspasa-3/7, generando fragmentos que se translocan al citoplasma, sufren auto-poli-ADP-ribosilación y sirven como portador de poli-ADP-ribosa pro-apoptótico para inducir la muerte celular mediada por AIFM1. Referencias relacionadas: PMID:33168626

Guía Experimental y Consejos Técnicos

• El inmunógeno es un péptido sintético correspondiente a los aminoácidos 700–800 de PARP1 humano (P09874). Esta región se encuentra dentro del dominio catalítico, lo que puede contribuir a la especificidad del anticuerpo por PARP1 de longitud completa.
• Para inmunofluorescencia (IF/ICC e IF-P), considere utilizar protocolos de fijación y permeabilización apropiados, e incluya líneas celulares o tejidos control positivo y negativo conocidos.
• Para inmunohistoquímica (IHC-P), las condiciones de recuperación antigénica y la dilución del anticuerpo deben optimizarse empíricamente; utilice tejidos humanos, de ratón o de rata con expresión confirmada de PARP1 como controles positivos.
• En ELISA, el emparejamiento con un anticuerpo de detección apropiado puede mejorar la sensibilidad; valide el ensayo con proteína PARP1 recombinante o lisados celulares.
• Debido al alto peso molecular (113kDa), asegure condiciones óptimas de transferencia de proteínas si utiliza western blot como método ortogonal.

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